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研究啥123

新虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母组氨酸缺陷型 已有1人参与

各位大神,求助一下,我质粒用的是pPICZαA,电转进毕赤酵母GS115后,在摇瓶中用BMGY和BMMY培养基可以正常生长表达,但是我在5L发酵罐用的BSM和FM22培养基(加了组氨酸)不能正常生长,菌体涨不起来,而且发酵大约20小时左右,溶氧长到130%-150%,不知道是什么原因?
求各位大神指点
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borrysa

金虫 (正式写手)

这个质粒不是万古霉素标签吗?能用营养缺陷型培养基?

发自小木虫Android客户端
2楼2021-12-15 16:50:36
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kk26

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
甲醇利用效率低,作为唯一碳源,生长缓慢。发酵过程通常会使用甘油做碳源先积累菌体,后期用甲醇诱导蛋白表达。
坚持的保持一种热爱!
3楼2021-12-16 10:55:57
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研究啥123

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by borrysa at 2021-12-15 16:50:36
这个质粒不是万古霉素标签吗?能用营养缺陷型培养基?

是博来霉素的抗性,不知道为什么无机盐培养基养不起来
4楼2021-12-21 20:50:08
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研究啥123

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by kk26 at 2021-12-16 10:55:57
甲醇利用效率低,作为唯一碳源,生长缓慢。发酵过程通常会使用甘油做碳源先积累菌体,后期用甲醇诱导蛋白表达。

是的,我前期是用甘油作为碳源积累菌体量,但是现在的问题是在菌体富集阶段菌体量达不到,文献中大多可以OD600为200左右,但是我的才50多,请问知道原因吗
5楼2021-12-21 20:52:51
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雪色残洋

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 研究啥123 at 2021-12-21 20:50:08
是博来霉素的抗性,不知道为什么无机盐培养基养不起来...

拿到菌株后,有没有筛选高拷贝子的菌株
6楼2022-01-10 13:41:14
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许阿君

新虫 (初入文坛)

朋友我想问下,在BMGY揺甁中你的浓度可以达到OD多少

发自小木虫Android客户端
7楼2022-04-07 10:21:03
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