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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 关于醋酸菌电转后能在抗性平板上生长的原因及解决办法
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四维星空

新虫 (小有名气)

[交流] 关于醋酸菌电转后能在抗性平板上生长的原因及解决办法

最近做醋酸菌菌的表达重组菌，原始菌株在抗性平板上不会生长，但是把做好的感受态涂抗性平板上就会生长，电转活化后，取培养液，长一大片，
请问：（1）电转后拥有抗性基因的醋酸菌和原始菌株都能生长的原因是什么呢？（没有污染）。
（2）出现这种情况该怎么解决呢？（提高抗性浓度吗？）谢谢有经验的大神告知，谢谢
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1楼 2021-12-14 15:49:57
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forhighbio

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我们做过巴氏醋酸杆菌的荧光质粒标记。

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2楼2021-12-14 22:25:18
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四维星空

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by forhighbio at 2021-12-14 22:25:18
我们做过巴氏醋酸杆菌的荧光质粒标记。

感觉抗性基因这个方法的确是有问题，电转后拥有质粒的菌、阴性和阳性对照在液体培养基理论和现实一样的结果，可是在平板上都生长就不知道为什么
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3楼2021-12-15 11:06:39
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forhighbio

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四维星空: 金币+3 2021-12-15 14:31:09
不会啊，操作方法没错的话，长出来的都是阳性克隆。

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4楼2021-12-15 11:49:42
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四维星空

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by forhighbio at 2021-12-15 11:49:42
不会啊，操作方法没错的话，长出来的都是阳性克隆。

我也是很郁闷，感觉是我涂平板的时候菌体 的浓度有问题，虽然平板上都长菌了，但是都没有可以继续做实验的菌落，都是密密麻麻的小菌落
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5楼2021-12-15 14:30:38
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