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四维星空

新虫 (小有名气)

[交流] 关于醋酸菌电转后能在抗性平板上生长的原因及解决办法

最近做醋酸菌菌的表达重组菌,原始菌株在抗性平板上不会生长,但是把做好的感受态涂抗性平板上就会生长,电转活化后,取培养液,长一大片,
请问:(1)电转后拥有抗性基因的醋酸菌和原始菌株都能生长的原因是什么呢?(没有污染)。
(2)出现这种情况该怎么解决呢?(提高抗性浓度吗?)谢谢有经验的大神告知,谢谢
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forhighbio

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我们做过巴氏醋酸杆菌的荧光质粒标记。

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2楼2021-12-14 22:25:18
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四维星空

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by forhighbio at 2021-12-14 22:25:18
我们做过巴氏醋酸杆菌的荧光质粒标记。

感觉抗性基因这个方法的确是有问题,电转后拥有质粒的菌、阴性和阳性对照在液体培养基理论和现实一样的结果,可是在平板上都生长就不知道为什么
3楼2021-12-15 11:06:39
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四维星空: 金币+3 2021-12-15 14:31:09
不会啊,操作方法没错的话,长出来的都是阳性克隆。

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4楼2021-12-15 11:49:42
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新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by forhighbio at 2021-12-15 11:49:42
不会啊,操作方法没错的话,长出来的都是阳性克隆。

我也是很郁闷,感觉是我涂平板的时候菌体 的浓度有问题,虽然平板上都长菌了,但是都没有可以继续做实验的菌落,都是密密麻麻的小菌落
5楼2021-12-15 14:30:38
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