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gooctober

金虫 (正式写手)

[交流] 测酶活的问题

最近测酶活,发现有的酶需要测一定时间内的吸光度改变值,但是按照实验方法做了之后发现很长时间内吸光度也不变化,加大样品量也没变化(从几十微升到200微升左右),问题可能出在哪里呢?另外我用的是非常老的拉杆的分光光度计,是不是因为仪器很老不灵敏造成的啊?但是我看资料一般都能变化0.1以上,而这种分光光度计都是0.001的啊,应该可以监测到变化吧??
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我是挂在屋角的风铃,你是风波动我心情~
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martinlitao

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
检查检查你的酶液(品质、酶用量),反应体系(底物浓度、缓冲液、产物浓度),以及实验条件(温度,pH,)是否正常。
记忆像叠在一起的写满文字的稿纸,被一杯水打湿了,渐渐那些文字模糊了,重叠了
7楼2009-08-26 11:29:56
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zhyzx

金虫 (小有名气)

好像没出现过你这种状况,以前我也用的是很老的那种仪器,不过发现都是变化比较大的啊,你换其他实验室的新一点的仪器试试。不过也可能跟你的样品有关吧。
2楼2009-08-25 19:07:19
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leirihua

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
amisking(金币+3,VIP+0):鼓励一个! 8-25 20:44
有可能是以下几种情况:
   1.酶催反应时,温度过高或过低,产物过少
   2.酶催反应时,ph值过高或过低
   3.反应体系中可能混有其他的蛋白酶,将酶水解了
   4.反应体系中有酶的变性剂或者抑制剂等
好好根据相关知识检查一下
3楼2009-08-25 20:40:44
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scholesfantasy

铁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有可能是你配的试剂有问题
4楼2009-08-25 20:43:18
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