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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 测酶活的问题
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gooctober

金虫 (正式写手)

[交流] 测酶活的问题

最近测酶活，发现有的酶需要测一定时间内的吸光度改变值，但是按照实验方法做了之后发现很长时间内吸光度也不变化，加大样品量也没变化（从几十微升到200微升左右)，问题可能出在哪里呢？另外我用的是非常老的拉杆的分光光度计，是不是因为仪器很老不灵敏造成的啊？但是我看资料一般都能变化0.1以上，而这种分光光度计都是0.001的啊，应该可以监测到变化吧？？
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我是挂在屋角的风铃，你是风波动我心情～
1楼 2009-08-25 18:19:22
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zhyzx

金虫 (小有名气)
好像没出现过你这种状况，以前我也用的是很老的那种仪器，不过发现都是变化比较大的啊，你换其他实验室的新一点的仪器试试。不过也可能跟你的样品有关吧。
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2楼2009-08-25 19:07:19
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leirihua

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
amisking(金币+3,VIP+0):鼓励一个！ 8-25 20:44
有可能是以下几种情况：
   1.酶催反应时，温度过高或过低，产物过少
   2.酶催反应时，ph值过高或过低
   3.反应体系中可能混有其他的蛋白酶，将酶水解了
   4.反应体系中有酶的变性剂或者抑制剂等
好好根据相关知识检查一下
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3楼2009-08-25 20:40:44
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scholesfantasy

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
有可能是你配的试剂有问题
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4楼2009-08-25 20:43:18
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stefa

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
90%的可能是你的反应体系有问题 我以前也总是测不出来
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5楼2009-08-25 20:45:01
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忘记将来

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也遇到相同的问题了，顶！
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6楼2009-08-25 20:51:46
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martinlitao

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
检查检查你的酶液（品质、酶用量），反应体系（底物浓度、缓冲液、产物浓度），以及实验条件（温度，pH，）是否正常。
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记忆像叠在一起的写满文字的稿纸，被一杯水打湿了，渐渐那些文字模糊了，重叠了
7楼2009-08-26 11:29:56
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