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空盖子

铜虫 (初入文坛)

[交流] 包涵体的提取

大家好,我现在的问题是想跑蛋白,将菌体的所有蛋白都拿到然后跑电泳,但是可能我的蛋白表达后以包涵体的形式存在,我怎么能让所有的蛋白都溶解呢
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
同意楼上~但必须查询相关文献~
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2009-08-25 19:44:14
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mango70803575

银虫 (小有名气)

试试用变性剂(如8M尿素)溶解,然后再复性吧!
过去的一切等于零,现在的一切从零开始!
2楼2009-08-25 18:21:25
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x8q4h11

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
跑电泳不用提取包涵体的   用菌液直接做变性电泳   蛋白条带就都可以出来了
4楼2009-08-25 21:35:46
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anik

银虫 (正式写手)

你找下关于蛋白分离的实验手册,上面有怎么变化条件尽量使蛋白的表达分泌在溶液中。

如果实在不能溶解的话,也不要紧,将细胞破碎(超声波法),离心,取沉淀,然后用PBS溶解,上样电泳即可。
5楼2009-08-25 22:12:36
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