应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教：接头连接是否会在表达产物中引入所需克隆外的氨基酸？
111/2返回列表12下一页
查看: 515  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

honglix

银虫 (正式写手)

[交流] 请教：接头连接是否会在表达产物中引入所需克隆外的氨基酸？

在克隆DNA两端引入接头时，是否会在其表达产物中加入额外的氨基酸？引入的接头如果碱基数是除以3后余2个或1个碱基时，是否会引起翻译时的移码而表达出所不需要的产物？若是，怎样消除；如不是，是什么原因？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-08-25 12:55:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★
honglix(金币+1,VIP+0): 8-25 20:46
所谓接头，只是在克隆时起连接作用的，它是位于启动子和终止子之外的，所以是不会翻译的。只有位于启动子和终止子之间的部分在表达时才被翻译。
赞一下(4人) 回复此楼
生物资源交流QQ群：1044518333
2楼2009-08-25 13:30:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
honglix(金币+1,VIP+0): 8-25 20:46
从起始密码子向前3个3个推就行，引入酶切位点如果不注意就会移码。
赞一下(4人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
3楼2009-08-25 14:55:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panacea007

银虫 (小有名气)
★
honglix(金币+1,VIP+0): 8-25 20:47
看看你用什么表达体系，以及怎么表达了。

如果用E. coli做胞内表达，就不存在这个问题，因为你会加一个起始密码子，酶切位点应该在起始密码子外，不会翻译。

如果用Pichia pastoris 做胞外表达， 加入不合适的酶切位点肯定会引起表达，因为你的基因肯定是连在信号肽后面，而表达是从信号肽开始的。

选择多克隆位点的酶切位点 一般不会移码突变，自己看看就是了。

[ Last edited by panacea007 on 2009-8-25 at 15:06 ]
赞一下(4人) 回复此楼
4楼2009-08-25 15:05:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhyzx

金虫 (小有名气)
学习了，呵呵！
回复此楼
5楼2009-08-25 15:20:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

honglix

银虫 (正式写手)
如果是想在一个蛋白端连接另一短肽，怎样顺利接上不引起蛋白质功能变化
赞一下 回复此楼
6楼2009-08-25 20:56:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是小梅

新虫 (初入文坛)
学习学习！
回复此楼
7楼2009-08-25 21:20:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anik

银虫 (正式写手)
★ ★
honglix(金币+2,VIP+0): 8-26 07:21
楼上的几个观点我不尽相同。
在蛋白表达时，无论原核还是真核，核糖体结合到mRNA上，只有找到ATG这个起始密码子才开始翻译。
前面的接头无论多少，对其表达是没有多大影响的。
原核和真核表达载体上的启动子只在转录时起作用。
赞一下(3人) 回复此楼
8楼2009-08-25 22:21:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stred

至尊木虫 (文坛精英)

蓝翔技校优秀毕业生
祝福楼主啊
回复此楼
耕读苍冥水静待老山秋
9楼2009-08-26 02:17:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangyx0411702

铁杆木虫 (正式写手)
学习学习了
回复此楼
10楼2009-08-26 08:56:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 honglix 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 300求调剂，材料科学英一数二 +5 leaflight 2026-03-24 5/250 2026-03-24 16:25 by laoshidan
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +4 曼111 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:44 by 星空星月
[考研] 一志愿哈工大，085400，320，求调剂 +3 gdlf9999 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:08 by 搏击518
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 335分 | 材料与化工专硕 | GPA 4.07 | 有科研经历 +4 cccchenso 2026-03-23 4/200 2026-03-23 23:00 by 徐ckkk
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +6 ￣^￣゜汗 2026-03-19 9/450 2026-03-23 19:53 by pswait
[考研] 求调剂一志愿海大，0703化学学硕304分，有大创项目，四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 289材料与化工（085600）B区求调剂 +3 这么名字咋样 2026-03-22 4/200 2026-03-22 17:56 by 云民大李老师
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 材料 336 求调剂 +3 An@. 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:39 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大，求调剂 +5 材化逐梦人 2026-03-18 5/250 2026-03-21 00:26 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭