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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教大肠杆菌细胞破碎方法
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rural2084

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
大肠杆菌煮煮就能破啊。
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11楼2009-08-24 19:50:15
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stefa

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by rural2084 at 2009-8-24 19:50:
大肠杆菌煮煮就能破啊。

不会吧  哪有这么简单啊
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12楼2009-08-24 20:22:08
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yzuxhq368

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
做RT不能用煮沸法，杂蛋白太多
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13楼2009-08-24 20:43:16
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stefa

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yzuxhq368 at 2009-8-24 20:43:
做RT不能用煮沸法，杂蛋白太多

那该怎么处理呢  急求
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14楼2009-08-24 20:46:28
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baiyidao

金虫 (小有名气)
把菌体煮沸离心上清走电泳
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15楼2009-08-24 20:51:42
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stefa

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by baiyidao at 2009-8-24 20:51:
把菌体煮沸离心上清走电泳

这么简单？
我做的是 表达载体pgex在大肠杆菌里表达GST融合蛋白
这样能进行后续的提纯嘛
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16楼2009-08-24 21:04:13
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果实验室没有超声波 高压细胞破碎仪 这类破壁工具的话,提前考虑宿主细胞的时候

可以选用DE3 plus.这个好破壁.能够自溶.

好运
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
17楼2009-08-24 21:52:37
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stefa

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2009-8-24 21:52:
如果实验室没有超声波 高压细胞破碎仪 这类破壁工具的话,提前考虑宿主细胞的时候

可以选用DE3 plus.这个好破壁.能够自溶.

好运

啊 这个宿主也没的啊 我用DH5 做的
应该用溶菌酶可以处理的吧
谁做过介绍点经验啊
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18楼2009-08-24 21:58:39
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l_inhumain

金虫 (小有名气)
★
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只为了跑SDS-PAGE点用的话取点菌体洗一下，悬浮后，加入LOADING BUFFER 煮十分钟，离心跑电泳就可以了，不要破包
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19楼2009-08-24 22:57:40
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stefa

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by l_inhumain at 2009-8-24 22:57:
只为了跑SDS-PAGE点用的话取点菌体洗一下，悬浮后，加入LOADING BUFFER 煮十分钟，离心跑电泳就可以了，不要破包

那如果是胞内的蛋白质 不是检测不出来了？
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20楼2009-08-25 09:19:45
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