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rural2084

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
大肠杆菌煮煮就能破啊。
11楼2009-08-24 19:50:15
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stefa

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by rural2084 at 2009-8-24 19:50:
大肠杆菌煮煮就能破啊。

不会吧  哪有这么简单啊
12楼2009-08-24 20:22:08
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yzuxhq368

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
做RT不能用煮沸法,杂蛋白太多
13楼2009-08-24 20:43:16
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stefa

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yzuxhq368 at 2009-8-24 20:43:
做RT不能用煮沸法,杂蛋白太多

那该怎么处理呢  急求
14楼2009-08-24 20:46:28
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baiyidao

金虫 (小有名气)

把菌体煮沸离心上清走电泳
15楼2009-08-24 20:51:42
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stefa

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by baiyidao at 2009-8-24 20:51:
把菌体煮沸离心上清走电泳

这么简单?
我做的是 表达载体pgex在大肠杆菌里表达GST融合蛋白
这样能进行后续的提纯嘛
16楼2009-08-24 21:04:13
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果实验室没有超声波 高压细胞破碎仪 这类破壁工具的话,提前考虑宿主细胞的时候

可以选用DE3 plus.这个好破壁.能够自溶.

好运
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
17楼2009-08-24 21:52:37
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stefa

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2009-8-24 21:52:
如果实验室没有超声波 高压细胞破碎仪 这类破壁工具的话,提前考虑宿主细胞的时候

可以选用DE3 plus.这个好破壁.能够自溶.

好运

啊 这个宿主也没的啊 我用DH5 做的
应该用溶菌酶可以处理的吧
谁做过介绍点经验啊
18楼2009-08-24 21:58:39
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l_inhumain

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
只为了跑SDS-PAGE点用的话取点菌体洗一下,悬浮后,加入LOADING BUFFER 煮十分钟,离心跑电泳就可以了,不要破包
19楼2009-08-24 22:57:40
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stefa

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by l_inhumain at 2009-8-24 22:57:
只为了跑SDS-PAGE点用的话取点菌体洗一下,悬浮后,加入LOADING BUFFER 煮十分钟,离心跑电泳就可以了,不要破包

那如果是胞内的蛋白质 不是检测不出来了?
20楼2009-08-25 09:19:45
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