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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教大肠杆菌细胞破碎方法
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stefa

新虫 (小有名气)

[交流] 请教大肠杆菌细胞破碎方法

RT
需要详细的步骤，最好是用溶菌酶处理的方法,谢谢了！

[ Last edited by stefa on 2009-8-24 at 20:31 ]
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1楼 2009-08-24 13:57:43
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bettyshan

木虫 (正式写手)

梦幻biobrick
我们实验室发酵大肠杆菌，所以蛋白是胞内，破碎的时候直接高压匀浆，再分离纯化，效果非常好。楼主不妨也可以试试啊~
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我们都是芸芸众生的小人物，相遇相知，都是幸福！
28楼2009-08-25 23:44:26
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stefa

新虫 (小有名气)
★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-24 21:09
我按照分子克隆指南里第15章方案5的做法用溶菌酶处理抽提细胞
但是跑sds-page的时候，却没有条带
说明没有破碎细胞，也没有提取到蛋白
请问有没有人用这个方法做过啊
赞一下(10人) 回复此楼
2楼2009-08-24 15:30:09
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
干嘛非用溶菌酶？ 直接冰浴超声不行吗？
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
3楼2009-08-24 16:29:04
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
若是为了走SDS-PAGE， 我都直接拿细胞做的，根本不用破的。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2009-08-24 16:30:12
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