24小时热门版块排行榜    

查看: 606  |  回复: 4
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhangn516

[交流] GTC法提取细胞总RNA过程中每个试剂的作用是什么?

将β巯基乙醇+2M NaAc加入GTC裂解的细胞悬液中,混匀,加入酸酚和氯仿,混匀离心,再加氯仿和上清,混匀离心,再加异丙醇过夜沉淀。
这其中每一步试剂的作用有人能给一一介绍一下嘛?谢谢。。。

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-4 at 10:13 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader


zhangn516(金币+1,VIP+0): 8-24 09:20
2M NaAc一个作用是调节ph值(大约PH=4左右),一个是沉淀疏水性的DNA的吧;酸酚和氯仿使蛋白变性同时使之沉淀(离心);氯仿是为了减少RNA的损失同时去除蛋白残余;异丙醇是用来沉淀DNA(亲水性)和RNA的(最后要加DNAase去除DNA)
会当凌绝顶,一览众山小
3楼2009-08-24 03:54:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

xiaolei8555

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
sutao1979(金币+1,VIP+0): 8-24 03:11
zhangn516(金币+1,VIP+0): 8-24 09:20
β巯基乙醇-抗氧化;2M NaAc-不清楚;酸酚和氯仿-去除DNA、蛋白和多糖等杂质;

氯仿-去除酸酚;异丙醇-沉淀RNA
2楼2009-08-23 23:22:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangn516

β巯基乙醇抗氧化是用来做什么的?抑制RNase的活性吗?
4楼2009-08-24 09:22:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

引用回帖:
Originally posted by zhangn516 at 2009-8-24 09:22:
β巯基乙醇抗氧化是用来做什么的?抑制RNase的活性吗?

----完全正确,但是其他作用应当是抑制多酚和色素酶的活性
会当凌绝顶,一览众山小
5楼2009-08-24 16:26:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +8 majunge000 2026-08-11 10/500 2026-08-15 18:55 by Equinoxhua
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +11 archvillain 2026-08-15 20/1000 2026-08-15 17:47 by 医学老男孩
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见