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bibi419

铜虫 (小有名气)

[交流] 请教取组织时的细节问题,为提取RNA用

我想请教一下,我要取大鼠组织中的五个脏器,每组有3只,
是为了提取RNA,做进一步实验的。
在提取组织前需要对手术器械做什么处理?
在提取过程中,需要清洗手术器械或着处理吗?要怎么处理呢?
组织需要用生理盐水清洗吗?
可以的话,请详细说提组织和放入液氮之间的步骤
谢谢!!

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-4 at 10:10 ]
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fengchang-qiao

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
350784478(金币+2,VIP+0):感谢回答 9-4 10:09
手术器械,枪头和管子等要用DEPC水处理,除掉RNAase
5楼2009-08-24 11:01:46
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ylcui

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
司马诸葛(金币+2,VIP+0):谢谢交流 8-23 20:00
bibi419(金币+10,VIP+0):谢谢 8-24 09:08
其实在取材的时候不必要太过仔细,否则影响效率。

但是组织保存必须严格,要用无RNA酶的冻存管保存,迅速投入液氮。

后面提取RNA操作的步骤,也必须严格着装防止RNA酶污染。
2楼2009-08-23 19:43:49
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
司马诸葛(金币+2,VIP+0):谢谢交流 8-23 19:59
bibi419(金币+10,VIP+0):谢谢 8-24 09:09
器械稍微泡下酒精应该就可以了
取出来之后如果不立刻用就放离心管里头放-80,不会很快降解的
要立刻用的话,就加Trizol冰浴匀浆
除非是硬组织,否则无需液氮研磨这么麻烦
3楼2009-08-23 19:50:09
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

另外,洗洗当然好些,把那些乱七八糟的比如血细胞洗掉都好
4楼2009-08-23 19:50:45
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