24小时热门版块排行榜    

查看: 1020  |  回复: 7
当前主题已经存档。

bibi419

铜虫 (小有名气)

[交流] 请教取组织时的细节问题,为提取RNA用

我想请教一下,我要取大鼠组织中的五个脏器,每组有3只,
是为了提取RNA,做进一步实验的。
在提取组织前需要对手术器械做什么处理?
在提取过程中,需要清洗手术器械或着处理吗?要怎么处理呢?
组织需要用生理盐水清洗吗?
可以的话,请详细说提组织和放入液氮之间的步骤
谢谢!!

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-4 at 10:10 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ylcui

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
司马诸葛(金币+2,VIP+0):谢谢交流 8-23 20:00
bibi419(金币+10,VIP+0):谢谢 8-24 09:08
其实在取材的时候不必要太过仔细,否则影响效率。

但是组织保存必须严格,要用无RNA酶的冻存管保存,迅速投入液氮。

后面提取RNA操作的步骤,也必须严格着装防止RNA酶污染。
2楼2009-08-23 19:43:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
司马诸葛(金币+2,VIP+0):谢谢交流 8-23 19:59
bibi419(金币+10,VIP+0):谢谢 8-24 09:09
器械稍微泡下酒精应该就可以了
取出来之后如果不立刻用就放离心管里头放-80,不会很快降解的
要立刻用的话,就加Trizol冰浴匀浆
除非是硬组织,否则无需液氮研磨这么麻烦
3楼2009-08-23 19:50:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

另外,洗洗当然好些,把那些乱七八糟的比如血细胞洗掉都好
4楼2009-08-23 19:50:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengchang-qiao

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
350784478(金币+2,VIP+0):感谢回答 9-4 10:09
手术器械,枪头和管子等要用DEPC水处理,除掉RNAase
5楼2009-08-24 11:01:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bibi419

铜虫 (小有名气)

金币发完了

金币发完了,谢谢你们
6楼2009-08-24 19:05:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caicaiyy

铜虫 (小有名气)

再还没提RNA之前注意无菌操作就行了,到提RNA的是后器具都得用DEPC处理水浸泡24小时候再高压灭菌
7楼2009-10-07 16:17:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
EP管和手术刀片最好都用新的,去RNA酶处理。
还有一点是:组织最好不要太多,20-200 mg就够了。
一定要用专业的组织RNA保存液(试剂盒有卖)处理后液氮保存!

以下专业资料送给MM,半夜下载不要金币。


WORD版,共52页

       兰州大学 王映珍

主要内容如下:
第一章:PCR和RT-PCR基础
第二章:增加RT-PCR灵敏度
第三章:增加RT-PCR特异性
第四章:RT-PCR应用
第五章:增加PCR特异性
第七章:提高忠实性
第八章: 其他需要考虑的事情
第九章: PCR应用
第十章: PCR产物克隆
第十一章:PCR扩增产物表达的快速方法
附录B: 测定PLATINUMTM pfx DNA聚合酶的保真度
附录C: 使用一步法RT-PCR从单一细胞中检测基因
第十二章:疑难解答
第十三章:相关产品
附录A: 引物序列精选
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
8楼2009-10-07 17:30:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bibi419 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +6 Ldrop2023 2026-08-13 6/300 2026-08-15 10:09 by tuanggou
[基金申请] filecode +7 cratir 2026-08-14 11/550 2026-08-15 06:19 by 学员8dgXkO
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:41 by 4wMiSEwB6436
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 4/200 2026-08-15 04:17 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +11 Tide man 2026-08-10 12/600 2026-08-15 02:12 by home3163
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:28 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
请填处理意见