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thp2001ywtk

新虫 (初入文坛)

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[求助] 请教发酵液中肽分子量的分布如何测？

大家好，目前我接受一个项目，说是要测发酵液中肽分子量分布（小于180，180-400，400-1000，1000-2000和大于2000）在网上查询了一下，基本用HPLC和GPC方法来测。我们这里也有LC-MS。因为之前我没有做过肽分子量分布，没有这放方面的经历。但是有小分子的HPLC方面的经验，我现在的问题如下：

1.用哪些标准品来做标准曲线？

2.用什么柱子合适，我们这里都是C18柱子，

3.用什么流动相合适，

4.发酵液要不要分离，如何分离？

3.检测出来后，如何计算？

我相信对于大咖来说很简单，但是多于我来说很难。

请大家指点一二或者给我推荐相关资料也行。谢谢！！

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1楼2021-10-19 17:50:36

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thp2001ywtk

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引用回帖:

2楼: Originally posted by yankunsu1862 at 2021-10-21 08:09:41
我以前做分子量分布，首先应该是分离提纯，再用液相GPC色谱柱进行分离，首先应该是进标样按照软件提示进行分子量切割，在进样品进行计算

谢谢您的回复，就检测方法来说，我们这里有一台waters 1515 的GPC,昨天我也问waters的工程师，不建议我用这台仪器，说是太老了，管道可能产生吸附。建议我用ms，刚好我们这里有一台waters QDA , 用C8 C4 孔径300A的色谱柱，我们也没有这种柱子。其实对于这一块来说，我就是小白。不知道流动相，对照品该怎么选？标准曲线该怎么做？一头雾水，很需要补课。请问有这方法的相关资料吗？在百度上找了，相关资料也很少！