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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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thp2001ywtk

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教 发酵液中肽分子量的分布如何测?

大家好,目前我接受一个项目,说是要测发酵液中肽分子量分布(小于180,180-400,400-1000,1000-2000和大于2000)在网上查询了一下,基本用HPLC和GPC方法来测。我们这里也有LC-MS。因为之前我没有做过肽分子量分布,没有这放方面的经历。但是有小分子的HPLC方面的经验,我现在的问题如下:

1.用哪些标准品来做标准曲线?

2.用什么柱子合适,我们这里都是C18柱子,

3.用什么流动相合适,

4.发酵液要不要分离,如何分离?

3.检测出来后,如何计算?

我相信对于大咖来说很简单,但是多于我来说很难。

请大家指点一二或者给我推荐相关资料也行。谢谢!!
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yankunsu1862

新虫 (初入文坛)

我以前做分子量分布,首先应该是分离提纯,再用液相GPC色谱柱进行分离,首先应该是进标样按照软件提示进行分子量切割,在进样品进行计算
2楼2021-10-21 08:09:41
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thp2001ywtk

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yankunsu1862 at 2021-10-21 08:09:41
我以前做分子量分布,首先应该是分离提纯,再用液相GPC色谱柱进行分离,首先应该是进标样按照软件提示进行分子量切割,在进样品进行计算

谢谢您的回复,就检测方法来说,我们这里有一台waters 1515 的GPC,昨天我也问waters的工程师,不建议我用这台仪器,说是太老了,管道可能产生吸附。建议我用ms,刚好我们这里有一台waters QDA ,  用C8 C4 孔径300A的色谱柱,我们也没有这种柱子。其实对于这一块来说,我就是小白。不知道流动相,对照品该怎么选?标准曲线该怎么做?一头雾水,很需要补课。请问有这方法的相关资料吗?在百度上找了,相关资料也很少!
3楼2021-10-21 10:05:11
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