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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】色谱柱的平衡
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yzy_0106

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】色谱柱的平衡

现在用的是梯度洗脱，那么在进样之间，柱子应该平衡多长时间啊？流速是1ml/min。现在的重现性不好啊
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1楼 2009-08-21 21:37:07
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hplc1019

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
chiraler(金币+1,VIP+0):感谢回复！ 8-21 22:43
一般一个小时左右就可以了
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2楼2009-08-21 21:47:37
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chiraler

荣誉版主 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
opq691(金币+1,VIP+0):^-^ 8-25 20:40
具体时间不能一概而论，关键是基线平了就可以了吧！最好梯度程序里面设定一个冲柱子和平衡柱子的时间！
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尊重结果，享受过程！
3楼2009-08-21 22:44:39
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qwert9893

银虫 (小有名气)

posttime的问题

★
chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢回复！ 8-22 14:50
一般我们进样后，再让他平衡10分钟足够了。如果你的梯度变化过大，应考虑时间延长。
这些都是你方法摸索中应该解决好的问题，不应该拖到现在。
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4楼2009-08-22 09:03:36
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chinabull

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢回复！ 8-22 14:50
真正平衡时间有公式可以计算的，但是实际工作中只要基线稳定了就行。流速1mL/min情况下，150*4.6的柱子大概15min-20min，250*4.6的柱子大概30min。仅供参考。
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5楼2009-08-22 09:51:53
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djc9801

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢回复！ 8-22 14:50
最好看一下你的梯度我才能给出更好的结果，楼上的几位平衡时间太长了，我个人一般平衡10 min左右。时间太长了，感觉有点浪费，如果时间太短，就会对后面样产生影响（出峰时间）。自己操作几次就有经验了。理论上肯定是平衡时间越长越好，时间在不影响结果的情况下，10 min是最短了。
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6楼2009-08-22 10:04:51
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joanna878

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
opq691(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流，欢迎常来分析版 8-25 20:41
如果柱子长时间没有用得话平衡的时间就要长一些，一两个小时差不多，如果短时间那就看基线是不是走稳了。
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7楼2009-08-22 10:12:06
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joanna878

金虫 (小有名气)
★
opq691(金币+1):谢谢回帖交流，欢迎常来分析版
不行就走个空梯度看看，是不是还有别的杂质没洗脱下来
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8楼2009-08-22 10:15:55
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xiaoxiao7239

木虫 (小有名气)
★
opq691(金币+1):谢谢回帖交流，欢迎常来分析版
不同的柱子柱体积不一样，所以平衡需要的时间也不一样，原则是用10到15倍柱体积的流动相过柱子就行啦。
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9楼2009-08-22 10:35:40
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yzy_0106

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by qwert9893 at 2009-8-22 09:03:
一般我们进样后，再让他平衡10分钟足够了。如果你的梯度变化过大，应考虑时间延长。
这些都是你方法摸索中应该解决好的问题，不应该拖到现在。

0-45min,10%-67.5%B
45-47MIN 67.5%-100%B
B为乙腈：醋酸铵：甲醇=55：35：10
我现在每次是平衡30分钟
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10楼2009-08-22 12:08:05
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