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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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yzy_0106

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】色谱柱的平衡

现在用的是梯度洗脱,那么在进样之间,柱子应该平衡多长时间啊?流速是1ml/min。现在的重现性不好啊
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hplc1019

银虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
chiraler(金币+1,VIP+0):感谢回复! 8-21 22:43
一般一个小时左右就可以了
2楼2009-08-21 21:47:37
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chiraler

荣誉版主 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
opq691(金币+1,VIP+0):^-^ 8-25 20:40
具体时间不能一概而论,关键是基线平了就可以了吧!最好梯度程序里面设定一个冲柱子和平衡柱子的时间!
尊重结果,享受过程!
3楼2009-08-21 22:44:39
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qwert9893

银虫 (小有名气)

posttime的问题


chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢回复! 8-22 14:50
一般我们进样后,再让他平衡10分钟足够了。如果你的梯度变化过大,应考虑时间延长。
这些都是你方法摸索中应该解决好的问题,不应该拖到现在。
4楼2009-08-22 09:03:36
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chinabull

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
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chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢回复! 8-22 14:50
真正平衡时间有公式可以计算的,但是实际工作中只要基线稳定了就行。流速1mL/min情况下,150*4.6的柱子大概15min-20min,250*4.6的柱子大概30min。仅供参考。
5楼2009-08-22 09:51:53
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djc9801

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢回复! 8-22 14:50
最好看一下你的梯度我才能给出更好的结果,楼上的几位平衡时间太长了,我个人一般平衡10 min左右。时间太长了,感觉有点浪费,如果时间太短,就会对后面样产生影响(出峰时间)。自己操作几次就有经验了。理论上肯定是平衡时间越长越好,时间在不影响结果的情况下,10 min是最短了。
6楼2009-08-22 10:04:51
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joanna878

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
opq691(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流,欢迎常来分析版 8-25 20:41
如果柱子长时间没有用得话平衡的时间就要长一些,一两个小时差不多,如果短时间那就看基线是不是走稳了。
7楼2009-08-22 10:12:06
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joanna878

金虫 (小有名气)


opq691(金币+1):谢谢回帖交流,欢迎常来分析版
不行就走个空梯度看看,是不是还有别的杂质没洗脱下来
8楼2009-08-22 10:15:55
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xiaoxiao7239

木虫 (小有名气)


opq691(金币+1):谢谢回帖交流,欢迎常来分析版
不同的柱子柱体积不一样,所以平衡需要的时间也不一样,原则是用10到15倍柱体积的流动相过柱子就行啦。
9楼2009-08-22 10:35:40
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yzy_0106

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by qwert9893 at 2009-8-22 09:03:
一般我们进样后,再让他平衡10分钟足够了。如果你的梯度变化过大,应考虑时间延长。
这些都是你方法摸索中应该解决好的问题,不应该拖到现在。

0-45min,10%-67.5%B
45-47MIN 67.5%-100%B
B为乙腈:醋酸铵:甲醇=55:35:10
我现在每次是平衡30分钟
10楼2009-08-22 12:08:05
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