应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物科学 » hc-material » 你好，我蛋白透析的时候，透析袋是截留量8～14kDa的，但是...
31/1返回列表
查看: 1245  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者ZSder将赠送您 5 个金币

ZSder

新虫 (初入文坛)

[求助] 你好，我蛋白透析的时候，透析袋是截留量8～14kDa的，但是...

你好，我蛋白透析的时候，透析袋是截留量8～14kDa的，但是透析完跑电泳大分子蛋白却没了，小分子蛋白却还在，（期间更换透析液的时候，第一次跟最后一次，透析液都变浑浊了）。请问是我透析夹没夹紧的原因吗？我透析袋是两头都浸没在透析液里的，还是另外的原因？

然后我蛋白提纯做ATKA纯化的时候，目标条带35kDA，还是有30跟25kDa杂带，能不能通过什么方法解决？

@hc-material 发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2021-09-26 10:33:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
大蛋白在透析过程中沉淀了吧。
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2021-09-26 11:06:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一个不小心就

金虫 (正式写手)
这显然是沉淀了呀，你把沉淀也跑个胶就知道了。
去除杂蛋白需要试不同方法，不试谁也不知道那种方法好。一些方法供你参考：
1，裂菌后上清用硫酸铵沉淀。如果你目的蛋白表达量很高，那应该比较容易被沉淀下来，合适的硫酸铵用量下能起一个初纯化的作用。
2，阴离子，阳离子，疏水层析都可以试。
3，等电点沉淀也可以用来纯化。
4，以上不能保证成功。有些蛋白就是难搞。
5，透析发生蛋白沉淀，说明你的透析液不太理想。加DTT了吗？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2021-09-27 15:28:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ZSder 的主题更新
31/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +5 majunge000 2026-08-10 5/250 2026-08-12 18:31 by wangze12014
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +8 Tide man 2026-08-11 8/400 2026-08-12 17:30 by Vivilian
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] 长年满屏的广告，版主太不责任了。基金也等的急 +4 gltch 2026-08-12 4/200 2026-08-12 16:08 by eulota
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 35/1750 2026-08-12 14:38 by sdfapple719
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭