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医学生物科研

铜虫 (小有名气)

[交流] 【实验经验】动物细胞培养中的问题与分析 已有1人参与

动物细胞培养是生物学基础实验中的基础,养不好细胞,后续的实验都难以开展。而细胞培养中也时常会有各种状况发生,例如细胞生长缓慢、细胞不贴壁等,那么它们可能的原因都有什么呢?让我们一起了解下吧!

Q

细胞生长缓慢

可能原因:

1.培养液及培养方法有误;更换不同培养液或血清也可能导致生长缓慢。

2.培养液中一些细胞生长必须成分如生长因子耗尽或缺乏。

3.培养物中有少量细菌或真菌污染;

4.接种细胞起始浓度太低;

5.细胞老化;

6.支原体污染。

解决方法

1.检查培养液和培养方法是否正确,比较新培养液与原培养液成分,让细胞逐渐适应新培养液;

2.换入新鲜配置培养液,或补加生长因子;

3.用无抗生素培养液培养,如发现污染,丢弃培养物;

4.增加接种细胞起始浓度;

5.换用新的保种细胞;

6.分离培养物,检测支原体,如发现支原体污染,丢弃培养物。



Q

细胞不贴壁生长

可能原因:

1.支原体污染。

2.培养瓶瓶底不干bai净。

3.培养液pH 值过碱(NaHCO3 分解)。

4.消化du液或培养液配制错误、过期储存、储存不当。

5.细胞老化(如传代前细胞已汇合导致失去贴附性)。

6.接种细胞起始浓度太低或太高。

解决方法:

1..缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度.

2.分离培养物,检测支原体.清洁支架和培养箱.如发现支原体污染,丢弃培养物.

3.注意刷洗,或换用一次性塑料培养瓶.

4.使用无菌醋酸溶液调整pH 值或充入无菌CO2(将培养液敞口放入培养箱也可).

5.重新配置消化液或培养液.

6.启用新的保种细胞.

7.调节最佳接种细胞浓度.



Q

培养细胞死亡

可能原因:

1.培养箱内无CO2;

2.培养箱内温度波动太大;

3.细胞冻存或复苏过程中损伤;

4.培养液渗透压不正确;

5.培养液中有毒代谢产物堆积。

解决方法:

1.检测培养箱内CO2;

2.检查培养箱内温度;

3.取新的保存细胞种;

4.检测培养液渗透压;

5.换入新鲜培养液。
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医学生物科研

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 南京百奥李勇 at 2021-09-23 11:36:26
请问需要小动物活体成像嘛?

我们实验室自己做,别人都是拿到我们这里做
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3楼2021-09-24 09:42:02
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南京百奥李勇

铜虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问需要小动物活体成像嘛?

发自小木虫Android客户端
一桶一子一力
2楼2021-09-23 11:36:26
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南京百奥李勇

铜虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by MDL科研 at 2021-09-24 09:42:02
我们实验室自己做,别人都是拿到我们这里做...

好的谢谢,你们需要设备可以给你推荐哈

发自小木虫Android客户端
一桶一子一力
4楼2021-09-24 13:06:03
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