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铜虫 (小有名气)

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专业: 实验动物学

[交流] 【实验经验】动物细胞培养中的问题与分析已有1人参与

动物细胞培养是生物学基础实验中的基础，养不好细胞，后续的实验都难以开展。而细胞培养中也时常会有各种状况发生，例如细胞生长缓慢、细胞不贴壁等，那么它们可能的原因都有什么呢？让我们一起了解下吧！

Q

细胞生长缓慢

可能原因：

1.培养液及培养方法有误；更换不同培养液或血清也可能导致生长缓慢。

2.培养液中一些细胞生长必须成分如生长因子耗尽或缺乏。

3.培养物中有少量细菌或真菌污染；

4.接种细胞起始浓度太低；

5.细胞老化；

6.支原体污染。

解决方法

1.检查培养液和培养方法是否正确，比较新培养液与原培养液成分，让细胞逐渐适应新培养液；

2.换入新鲜配置培养液，或补加生长因子；

3.用无抗生素培养液培养，如发现污染，丢弃培养物；

4.增加接种细胞起始浓度；

5.换用新的保种细胞；

6.分离培养物，检测支原体，如发现支原体污染，丢弃培养物。

Q

细胞不贴壁生长

可能原因：

1.支原体污染。

2.培养瓶瓶底不干bai净。

3.培养液pH 值过碱（NaHCO3 分解）。

4.消化du液或培养液配制错误、过期储存、储存不当。

5.细胞老化（如传代前细胞已汇合导致失去贴附性）。

6.接种细胞起始浓度太低或太高。

解决方法：

1..缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度.

2.分离培养物,检测支原体.清洁支架和培养箱.如发现支原体污染,丢弃培养物.

3.注意刷洗,或换用一次性塑料培养瓶.

4.使用无菌醋酸溶液调整pH 值或充入无菌CO2（将培养液敞口放入培养箱也可）.

5.重新配置消化液或培养液.

6.启用新的保种细胞.

7.调节最佳接种细胞浓度.

Q

培养细胞死亡

可能原因：

1.培养箱内无CO2；

2.培养箱内温度波动太大；

3.细胞冻存或复苏过程中损伤；

4.培养液渗透压不正确；

5.培养液中有毒代谢产物堆积。

解决方法：

1.检测培养箱内CO2；

2.检查培养箱内温度；

3.取新的保存细胞种；

4.检测培养液渗透压；

5.换入新鲜培养液。
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