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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白质多聚体的鉴定
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jiang_jjd

木虫 (小有名气)

[交流] 蛋白质多聚体的鉴定

我们的一个蛋白，SDS-PAGE电泳分子量和单体理论分子量一致为36KD，但可能是多聚体，跑PAGE电泳跑不下去，所以想请教有没有好的鉴定多聚体的方法？我们想订Gel filtration Cal Kit HMW来做，但是问遍了许多生物试剂公司都没有，请问在哪能买到。谢谢
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1楼 2009-08-20 15:49:13
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★ ★
jiang_jjd(金币+2,VIP+0):thanks 8-21 10:25
GE HEALTHCARE
不过经SDS变性，DTT还原还打不开的聚体可不多见
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2楼2009-08-20 16:53:50
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nnxqwei

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
jiang_jjd(金币+2,VIP+0):thanks 8-21 10:25
将你的蛋白纯化后跑非变性胶，用上标准分子量Marker, 看你的非变性蛋白的分子量是36KD的多少倍，就是几聚体了。。。
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3楼2009-08-20 20:38:16
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jiang_jjd

木虫 (小有名气)
可我们跑PAGE 电泳跑不下去啊！
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4楼2009-08-21 10:25:48
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nnxqwei

至尊木虫 (职业作家)
★
jiang_jjd(金币+1,VIP+0):谢谢 8-25 15:14
PAGE 电泳也没有多难的 ，可能是技术问题而已了。。。
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5楼2009-08-22 19:49:30
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
jiang_jjd(金币+1,VIP+0):谢谢 8-25 15:14
跑不下去

不太可能啊，不行把胶浓度调到最低，300多KD都能分开，你的蛋白不会是10聚体

吧。再不行的话就倒个大板胶高电压来跑，还不信了就。

[ Last edited by brightfuture01 on 2009-8-22 at 21:46 ]
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
6楼2009-08-22 21:44:54
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jiang_jjd

木虫 (小有名气)
我们跑PAGE 电泳的时候拖尾现象很严重，有什么方法可以解决呢？谢谢！
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7楼2009-08-25 15:17:26
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pingh_2004

铁虫 (初入文坛)
★ ★
jiang_jjd(金币+2,VIP+0): 8-27 11:22
可以跑一个SEC-HPLC

做非变性胶，需要综合考虑，蛋白的电荷及聚体情况才能做出判断
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8楼2009-08-27 10:13:47
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jiang_jjd

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by pingh_2004 at 2009-8-27 10:13:
可以跑一个SEC-HPLC

做非变性胶，需要综合考虑，蛋白的电荷及聚体情况才能做出判断

请问有没有具体的方法，和哪些机构能做？谢谢
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9楼2009-08-27 11:25:10
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一天718

金虫 (小有名气)
★ ★
jiang_jjd(金币+2,VIP+0): 8-28 09:22
SEC-HPLC肯定可以
非还原电泳也可以。跑不下去可能是胶的浓度太高了，降下来看看，36KD的蛋白分子量不算大的，另外电压可以高一点。
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10楼2009-08-27 12:01:20
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