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求助EC50值、ED50值的含义及在MTT试验中的算法
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| 求助EC50值、ED50值的含义及在MTT试验中的算法,还有就是EC50值、ED50值、IC50值表示的区别是什么?请赐教 |
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0818(金币+1,VIP+0): 8-20 16:32
0818(金币+1,VIP+0): 8-20 16:32
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MTT中 IC50的计算 步骤如下: 1:接种细胞:用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液,以每孔 1000-10000个细胞接种到96孔板,每孔体积200ul. 2:培养细胞:同一般培养条件,培养3-5天(可根据试验目的和要求决定培养时间)。 3:呈色:培养3-5天后,每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS 继续孵育4小时,终止培养,小心吸弃孔内培养上清液,对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO,振荡10分钟,使结晶物充分融解。 4:比色:选择490nm波长,在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值,记录结果,以时间为横坐标,吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。 注意事项: (1)选择适当得细胞接种浓度。 (2)避免血清干扰:一般选小于10%的胎牛血清的培养液进行试验。在呈色后尽量吸尽孔内残余培养液。 (3)设空白对照:与试验平行不加细胞只加培养液的空白对照。其他试验步骤保持一致,最后比色以空白调零。 MTT实验吸光度最后要在0-0.7之间,超出这个范围就不是直线关系, |
5楼2009-08-20 16:02:55
2楼2009-08-20 15:33:56
3楼2009-08-20 15:50:42
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0818(金币+1,VIP+0): 8-20 16:31
0818(金币+1,VIP+0): 8-20 16:31
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半数抑制浓度(IC50)意思是抑制率50%的时候药物的浓度。把药品稀释成不同的浓度,然后计算各自的抑制率,以药品的浓度为横坐标,抑制率为纵坐标作图,然后得到50%抑制率时候的药品浓度,就是IC50。 EC50是药物安全性指标。其含义是:引起50%个体有效的剂量扩大多少倍,才会导致50%的个体死亡(或中毒)。此值越大,用药相对越安全 ED50为半数有效量,产生50%阳性反应的剂量 LD50/ED50、TD50/ED50、TC50/EC50等统称为治疗指数,是一类药物的安全指标,通常其值越大越安全。需注意这些指标只反映治疗作用与急性毒性的关系,并不能反映慢性毒性、过敏性。 |
4楼2009-08-20 16:01:45













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