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求助EC50值、ED50值的含义及在MTT试验中的算法
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| 求助EC50值、ED50值的含义及在MTT试验中的算法，还有就是EC50值、ED50值、IC50值表示的区别是什么？请赐教 |
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0818(金币+1,VIP+0): 8-20 16:31
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半数抑制浓度(IC50)意思是抑制率50％的时候药物的浓度。把药品稀释成不同的浓度，然后计算各自的抑制率，以药品的浓度为横坐标，抑制率为纵坐标作图，然后得到50％抑制率时候的药品浓度，就是IC50。 EC50是药物安全性指标。其含义是：引起50%个体有效的剂量扩大多少倍，才会导致50%的个体死亡（或中毒）。此值越大，用药相对越安全 ED50为半数有效量，产生50%阳性反应的剂量 LD50/ED50、TD50/ED50、TC50/EC50等统称为治疗指数，是一类药物的安全指标，通常其值越大越安全。需注意这些指标只反映治疗作用与急性毒性的关系，并不能反映慢性毒性、过敏性。 |
4楼2009-08-20 16:01:45
2楼2009-08-20 15:33:56
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0818(金币+1,VIP+0): 8-20 16:32
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MTT中 IC50的计算 步骤如下： 1：接种细胞：用含10％胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液，以每孔 1000－10000个细胞接种到96孔板，每孔体积200ul. 2:培养细胞：同一般培养条件，培养3－5天（可根据试验目的和要求决定培养时间）。 3：呈色：培养3－5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS 继续孵育4小时，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO，振荡10分钟，使结晶物充分融解。 4：比色：选择490nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。 注意事项： （1）选择适当得细胞接种浓度。 （2）避免血清干扰：一般选小于10％的胎牛血清的培养液进行试验。在呈色后尽量吸尽孔内残余培养液。 （3）设空白对照：与试验平行不加细胞只加培养液的空白对照。其他试验步骤保持一致，最后比色以空白调零。 MTT实验吸光度最后要在0-0.7之间，超出这个范围就不是直线关系， |
5楼2009-08-20 16:02:55