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0818

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助EC50值、ED50值的含义及在MTT试验中的算法

求助EC50值、ED50值的含义及在MTT试验中的算法,还有就是EC50值、ED50值、IC50值表示的区别是什么?请赐教
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bbstar543

银虫 (小有名气)


0818(金币+1,VIP+0): 8-20 16:31
半数抑制浓度(IC50)意思是抑制率50%的时候药物的浓度。把药品稀释成不同的浓度,然后计算各自的抑制率,以药品的浓度为横坐标,抑制率为纵坐标作图,然后得到50%抑制率时候的药品浓度,就是IC50。
      EC50是药物安全性指标。其含义是:引起50%个体有效的剂量扩大多少倍,才会导致50%的个体死亡(或中毒)。此值越大,用药相对越安全
      ED50为半数有效量,产生50%阳性反应的剂量
LD50/ED50、TD50/ED50、TC50/EC50等统称为治疗指数,是一类药物的安全指标,通常其值越大越安全。需注意这些指标只反映治疗作用与急性毒性的关系,并不能反映慢性毒性、过敏性。
4楼2009-08-20 16:01:45
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裘建军8193

金虫 (正式写手)


0818(金币+1,VIP+0):谢谢 8-20 15:37
ED50计算的时候用的是每次剂量,EC50计算的是血药浓度,计算的单位不同,其实质是一样的。只能回答这么多(能力有限)
2楼2009-08-20 15:33:56
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bbstar543

银虫 (小有名气)


0818(金币+1,VIP+0): 8-20 16:00
受体激动剂的效应: ED50/EC50 ,ID50/IC50

                                E=Emax·[A]/([A]+KD)

        将E=Emax/2代入上式:
                                [A] = IC50 =KD =1/KA

激动剂的EC50值越小,与受体的亲和常数越大。
3楼2009-08-20 15:50:42
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bbstar543

银虫 (小有名气)


0818(金币+1,VIP+0): 8-20 16:32
MTT中 IC50的计算

步骤如下:
1:接种细胞:用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液,以每孔
1000-10000个细胞接种到96孔板,每孔体积200ul.

2:培养细胞:同一般培养条件,培养3-5天(可根据试验目的和要求决定培养时间)。

3:呈色:培养3-5天后,每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS 配)20ul.
继续孵育4小时,终止培养,小心吸弃孔内培养上清液,对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO,振荡10分钟,使结晶物充分融解。

4:比色:选择490nm波长,在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值,记录结果,以时间为横坐标,吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。

注意事项:
(1)选择适当得细胞接种浓度。
(2)避免血清干扰:一般选小于10%的胎牛血清的培养液进行试验。在呈色后尽量吸尽孔内残余培养液。
(3)设空白对照:与试验平行不加细胞只加培养液的空白对照。其他试验步骤保持一致,最后比色以空白调零。

MTT实验吸光度最后要在0-0.7之间,超出这个范围就不是直线关系,
5楼2009-08-20 16:02:55
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