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机器人1886

金虫 (正式写手)

[求助] 大肠杆菌和适配体(荧光基团FAM标记)结合的问题

请问大家:大肠杆菌和适配体的结合实验条件,我做的是:PBS(20mM,ph=7.4)大肠杆菌和适配体(FAM标记)孵育1h,离心后,重悬,荧光仪检测不到荧光信号。这是不是说明大肠杆菌和适配体没有结合呢?细菌和适配体进行特异性结合的条件是不是错误了?应该是什么条件呢?我想做细菌整菌的识别和检测。谢谢!
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我不是马甲哦!我是毛毛虫!
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ニノ

新虫 (初入文坛)

你好,请问你的问题解决了吗
2楼2022-08-18 14:07:08
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SXRH

新虫 (初入文坛)

您好!请问您目前解决了吗?我这边的情况也跟您差不多,利用猝灭材料聚多巴胺猝灭适配体标记的荧光素,加入目标物后,荧光没有恢复,适配体浓度、猝灭剂浓度都做了相应调整,没有效果,能否交流指教一下?
3楼2022-09-12 16:33:44
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zd_seu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by SXRH at 2022-09-12 16:33:44
您好!请问您目前解决了吗?我这边的情况也跟您差不多,利用猝灭材料聚多巴胺猝灭适配体标记的荧光素,加入目标物后,荧光没有恢复,适配体浓度、猝灭剂浓度都做了相应调整,没有效果,能否交流指教一下?

同样的问题,检测前,FAM荧光被quench;检测后,上清中理论应有大量FAM,但实际荧光强度极其微弱,远低于预期水平。

请问现在解决了吗?
4楼2023-07-28 17:36:32
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吱吱吱吱吱盒子

新虫 (初入文坛)

请问现在解决了吗?我的菌和适配体结合的也不是很好,求求求

发自小木虫Android客户端
5楼2024-10-17 02:44:44
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