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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大肠杆菌和适配体（荧光基团FAM标记）结合的问题
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机器人1886

金虫 (正式写手)

[求助] 大肠杆菌和适配体（荧光基团FAM标记）结合的问题

请问大家：大肠杆菌和适配体的结合实验条件，我做的是：PBS（20mM,ph=7.4）大肠杆菌和适配体（FAM标记）孵育1h，离心后，重悬，荧光仪检测不到荧光信号。这是不是说明大肠杆菌和适配体没有结合呢？细菌和适配体进行特异性结合的条件是不是错误了？应该是什么条件呢？我想做细菌整菌的识别和检测。谢谢！
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我不是马甲哦！我是毛毛虫！
1楼 2021-08-19 21:19:05
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ニノ

新虫 (初入文坛)
你好，请问你的问题解决了吗
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2楼2022-08-18 14:07:08
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SXRH

新虫 (初入文坛)
您好！请问您目前解决了吗？我这边的情况也跟您差不多，利用猝灭材料聚多巴胺猝灭适配体标记的荧光素，加入目标物后，荧光没有恢复，适配体浓度、猝灭剂浓度都做了相应调整，没有效果，能否交流指教一下？
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3楼2022-09-12 16:33:44
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zd_seu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by SXRH at 2022-09-12 16:33:44
您好！请问您目前解决了吗？我这边的情况也跟您差不多，利用猝灭材料聚多巴胺猝灭适配体标记的荧光素，加入目标物后，荧光没有恢复，适配体浓度、猝灭剂浓度都做了相应调整，没有效果，能否交流指教一下？

同样的问题，检测前，FAM荧光被quench；检测后，上清中理论应有大量FAM，但实际荧光强度极其微弱，远低于预期水平。

请问现在解决了吗？
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4楼2023-07-28 17:36:32
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吱吱吱吱吱盒子

新虫 (初入文坛)
请问现在解决了吗？我的菌和适配体结合的也不是很好，求求求

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5楼2024-10-17 02:44:44
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