24小时热门版块排行榜    

查看: 1278  |  回复: 8
当前主题已经存档。

忘记将来

木虫 (正式写手)

[交流] 设计引物求助

我用primer peimer5 设计引物时,下游引物插入的酶切位点的序列要输入正常序列还是反向互补序列?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你说呢?其实你只要试一下就知道了或者画个简图就知道了,这样保证你印象深刻啊
primer有个自动分析酶切位点的功能,第一次用需要你自己导入所要分析的酶
2楼2009-08-18 21:18:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

synhily

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
上下游引物设计好了以后,加入酶切位点的时候,从5到3的方向加上酶切位点即可。在酶切位点的外部(5端)加上保护碱基。

我明白你说的意思,保护碱基不用反向互补的加。
3楼2009-08-19 09:45:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
酶切位点是回文序列
反相互补序列不变
4楼2009-08-19 09:52:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

synhily

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
举个例子来说:
上游引物5-AATTCCGGAATTCCGG-3
下游引物5-ATCGATCGATCGATCG-3

现在要在上下游分别加上HindIII和BamHI保护碱基,那么从网上可以查到:
HindIII的酶切位点为:AAGCTT,保护碱基为:CCC
BamHI的酶切位点为:GGATCC,保护碱基为:CGC

那么加上保护碱基及酶切位点引物为:
上游:5-CCC   AAGCTT   AATTCCGGAATTCCGG-3
下游:5-CGC   GGATCC   ATCGATCGATCGATCG-3
5楼2009-08-19 09:53:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rural2084

木虫 (正式写手)

顶楼上的,有列子。
6楼2009-08-19 10:01:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忘记将来

木虫 (正式写手)

谢谢各位!
7楼2009-08-25 20:28:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hll8593

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
举例子的说的很详细很好。
8楼2009-09-05 15:29:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ytmito1986

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
酶切位点是回文序列
反相互补序列不变 ,怎么加都一样,呵呵
9楼2009-09-05 15:37:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 忘记将来 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 281求调剂 +3 Koxui 2026-03-24 4/200 2026-03-24 22:59 by barlinike
[考研] 07化学280分求调剂 +6 722865 2026-03-23 6/300 2026-03-24 20:58 by allen-yin
[考研] 086003食品工程求调剂 +5 淼淼111 2026-03-24 5/250 2026-03-24 20:53 by lailaisimei
[考研] 289求调剂 +8 硕星赴 2026-03-23 8/400 2026-03-24 20:17 by peike
[考研] 0854 考研调剂 招生了!AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +4 曼111 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:44 by 星空星月
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
[考研] 316求调剂 +7 梁茜雯 2026-03-19 7/350 2026-03-23 16:21 by lingjue
[考研] 291求调剂 +5 孅華 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:20 by haoshis
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 311求调剂 +3 勇敢的小吴 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:40 by ColorlessPI
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
信息提示
请填处理意见