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xiaomu3811

金虫 (小有名气)

[交流] walking问题求助

做walking,1stPCR和2ndPCR经电泳检测后都有条带,但就是3rd反复做不出来,请高手指点一下,急死了……谢谢
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xiaomu3811

金虫 (小有名气)

急啊。各位知道的大侠帮帮忙啊……
2楼2009-08-18 15:56:00
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zjwang

木虫 (正式写手)

什么是WALKING?我以为是TAIL-PCR
3楼2009-08-18 16:28:46
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xiaomu3811

金虫 (小有名气)

walking试剂盒里使用的PCR程序确实是TAIL-PCR,就是在第三步PCR上无结果,大家帮我分析分析
4楼2009-08-18 16:51:41
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崔红利

新虫 (正式写手)

★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-18 17:32
在第二步的基础上进行稀释PCR    试试吧    我以前就是这样做出来的   还有看一看序列大小差多少啊
5楼2009-08-18 16:54:58
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xiaomu3811

金虫 (小有名气)

将第二步的PCR产物稀释了,先稀释成了50倍,没出来,有稀释成了100ng/微升,还是没出来,郁闷啊,实在不知道什么原因了
6楼2009-08-18 16:57:29
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xiaomu3811

金虫 (小有名气)

“看一看序列大小差多少”是什么意思啊?
7楼2009-08-18 16:58:34
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zjwang

木虫 (正式写手)

第三步采用第二步的程序试试
8楼2009-08-18 17:07:21
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zjwang

木虫 (正式写手)

可能是第三轮的引物有问题
9楼2009-08-18 17:08:19
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xiaomu3811

金虫 (小有名气)

第三步的程序和第二部的PCR程序时一模一样的
10楼2009-08-18 17:09:13
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