| 查看: 2076 | 回复: 2 | |||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者小鱼的妈将赠送您 15 个金币 | |||
[求助]
基因克隆进载体在表达时可能出现移码，这种情况怎么避免？
|
|||
 最近在做抗体蛋白的真核表达，准备拿pcDNA3.1/His A来做真核表达载体，该载体图谱的酶切位点已上传。准备将Fc段基因克隆至Not I（GCGGCCGC） 和 Xba I (TCTAGA)之间，但是根据图谱的碱基来看,在Not I的最后两碱基(GC)后会存在缺少一个碱基组成三联密码子，因此我在设计引物PCR扩增Fc段酶切位点有意地在Not I后面（即Fc段之前)加入了一个碱基“T”，后面的Xba I 同上，这样的话相当于对Fc段基因做了改造，但是可以避免蛋白表达时出现移码，请问各位，这种增添碱基的方法有什么缺陷吗？  pcDNA3.1HIS.png |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有133人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
YU_DG
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3863.5
- 散金: 66
- 红花: 1
- 帖子: 720
- 在线: 68.2小时
- 虫号: 4126793
- 注册: 2015-10-08
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
2楼2021-07-29 14:53:55
ken19860823
木虫 (正式写手)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 3574.2
- 红花: 9
- 帖子: 875
- 在线: 107.4小时
- 虫号: 3150033
- 注册: 2014-04-20
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
3楼2021-07-30 09:47:31
10