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肠杆菌 基因敲除 诡异事件,求解! 已有1人参与
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请教大家,我敲了一个基因(通过引入一个抗性片段),现在挑选 抗性板上的菌落 用 外部引物PCR片段测序,是敲除成功的,因为测序结果就是含有抗性片段,但是内部引物PCR也还是能检测到,测序结果表明也是我要敲除的那个基因,请问是什么原因? 1. 有点诡异的是,以前内部引物只有一个条带,后来长出来的pcr发现有好几个条带了! 2. 不知道有没有这样子的原因,我敲除的片段是该基因的五分之四,ATG开头的五分之一没有敲除,这样子会有影响吗?但是我设计的内部引物是后面部分的 这个菌我已经在抗性板上划线传代两次了! |
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