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甘197

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒转化实验

自己构建的重组质粒转化入BL21,想做原核表达,但是挑菌PCR之后总是发现除了1000+ bp的目的条带之外,还有500+ bp的条带,请问这是怎么回事?做了几次都这样,marker是2000bp的

质粒转化实验


@hc-material @gyesang 发自小木虫Android客户端
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甘197

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 季末季末 at 2021-07-19 00:04:42
引物不特异吧,,你换个引物或者换一个退火温度试一下

试过了,做的梯度,54度到57度,都有图上的那个杂带

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4楼2021-07-20 19:35:00
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季末季末

新虫 (正式写手)

引物不特异吧,,你换个引物或者换一个退火温度试一下

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2楼2021-07-19 00:04:42
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甘197

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 季末季末 at 2021-07-19 00:04:42
引物不特异吧,,你换个引物或者换一个退火温度试一下

引物退火温度试过了不行

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3楼2021-07-19 21:07:00
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YU_DG

木虫 (正式写手)

做好对照,质粒做正对照,转空载的做副对照,加个水做空白对照。试试

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5楼2021-07-21 11:53:26
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