应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 大家帮我看看问题出在哪？质粒转化问题
182/2返回列表上一页12
查看: 910  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
goonhetty(金币+1,VIP+0): 8-18 12:27
呵呵,别管它了,直接提取重组的质粒,酶切下看看是不是目的片段,接着往下作......我也出现过类似的状况,转化空质粒结果一个不长,连接的反而长得很好,酶切了10个居然都是阳性的.就没有去重复那个对照了,姑且认为是涂布棒太烫烫死了...

不过楼主的严谨作风织的学习.
赞一下(1人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
11楼2009-08-16 17:56:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vivihao

金虫 (小有名气)
★
goonhetty(金币+1,VIP+0): 8-18 12:27
我也在做转BL21   用抽提出来的重组质粒转的，可是转了好几次都没有转成功。。按道理说  用质粒转化的效率应该很高啊，可楞是不长斑，我很郁闷啊，
赞一下(2人) 回复此楼
12楼2009-08-17 13:21:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微笑漩涡

新虫 (著名写手)
★
goonhetty(金币+1,VIP+0): 8-18 12:27
虽然说BL21的转化效率没有DH5a,Top10等的高,但是10的6次还是有的,自己作的差点10的5次也应该有吧,所以转化应该不是问题的.再试试看吧.
赞一下(2人) 回复此楼
13楼2009-08-17 13:28:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanfeng

金虫 (小有名气)
★
goonhetty(金币+1,VIP+0): 8-18 12:27
换其他的空载体尝试一下吧，有时候可能质粒自身放久了或其他原因也会出问题。
赞一下(2人) 回复此楼
14楼2009-08-17 16:10:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

goonhetty

木虫 (小有名气)
谢谢大家！又转了一次还是没成功！先放一下直接做表达吧！
赞一下 回复此楼
15楼2009-08-18 12:27:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouzhou_3006

木虫 (著名写手)
★
goonhetty(金币+1,VIP+0): 8-19 13:36
同情一下啊，不知道你涂板用的抗生素是不是加多了，可以适当把抗生素浓度降低些
赞一下 回复此楼
为梦想努力。
16楼2009-08-18 15:03:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

goonhetty

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhouzhou_3006 at 2009-8-18 15:03:
同情一下啊，不知道你涂板用的抗生素是不是加多了，可以适当把抗生素浓度降低些

多加５微升或１０微升算多吗？
赞一下 回复此楼
17楼2009-08-19 13:39:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

superyuanjia

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
空载体是单酶切还是双酶切，很有可能是自连
赞一下(1人) 回复此楼
18楼2009-08-19 15:47:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 goonhetty 的主题更新
182/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 7lpolszZVXgi 2026-08-14 5/250 2026-08-15 09:21 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 7/350 2026-08-15 09:09 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +24 医学老男孩 2026-08-13 50/2500 2026-08-15 06:38 by 学员8dgXkO
[基金申请] filecode +7 cratir 2026-08-14 11/550 2026-08-15 06:19 by 学员8dgXkO
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:45 by 4wMiSEwB6436
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:41 by 4wMiSEwB6436
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 02:21 by 4wMiSEwB6436
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:28 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +5 Ldrop2023 2026-08-13 5/250 2026-08-14 18:48 by ssxclkj
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭