| 查看: 2504 | 回复: 4 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者巴耶克将赠送您 10 个金币 | ||
[求助]
Sephadex G-100凝胶柱使用问题
|
||
小弟最近在做多糖的分级纯化，买了源叶的Sephadex G-100 100g，按照GE的说明书预处理：90℃热水溶胀5小时，待填料静置后将上层碎凝胶弃去。柱子一开始选择是2*100cm的规格（我看的文献大多是用这么长的柱子纯化），将填料倒入柱子，凝胶床高度是80cm，不加压情况下出液口流速越来越慢，甚至一分钟都没有一滴，最后直接不流了。我将凝胶压出又选了一个3*60cm的层析柱，这次大概装了50cm，待液面切平后上样后加蒸馏水洗脱，流速越来越慢，我试着在上面加压（用的那种增氧泵）过了一段时间后凝胶床膨胀到了60cm左右的高度，我赶紧把加压泵撤掉了，随着凝胶膨胀流速也不那么慢了。但是最后显色结果表明多糖没有分开，是一个宽峰。 这两个多糖测GPC显示一个分子量在7000，一个大概是40000，没有分开。 想问下各位大佬们，是哪里出问题了？Sephadex G-100是不耐压、不能装太高吗？但是要获得好的分辨率就必须要把柱子装高，这不就矛盾了吗？我是不是需要加一个恒流泵，来控制流速？谢谢各位。 |
回复此楼» 猜你喜欢
上海工程技术大学【激光智能制造】课题组招收硕士
已经有6人回复
-
带资进组求博导收留
已经有11人回复
-
自荐读博
已经有5人回复
-
求个博导看看
已经有16人回复
-
上海工程技术大学张培磊教授团队招收博士生
已经有4人回复
-
求助院士们，这个如何合成呀
已经有4人回复
-
临港实验室与上科大联培博士招生1名
已经有9人回复
-
写了一篇“相变储能技术在冷库中应用”的论文，论文内容以实验为主，投什么期刊合适？
已经有6人回复
-
最近几年招的学生写论文不引自己组发的文章
已经有11人回复
-
中科院杭州医学所招收博士生一名（生物分析化学、药物递送）
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
2楼2021-07-13 17:00:55
3楼2021-12-17 10:43:27
籽諾season
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 800.2
- 散金: 428
- 帖子: 424
- 在线: 29.2小时
- 虫号: 21193583
- 注册: 2020-02-24
- 专业: 微生物资源与分类学
4楼2022-06-29 15:51:30
jyngxj
银虫 (小有名气)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 770.7
- 散金: 57
- 帖子: 75
- 在线: 13.7小时
- 虫号: 29201496
- 注册: 2022-03-17
- 性别: MM
- 专业: 天然药物化学
5楼2022-06-30 12:30:32