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【求助】急求各位色谱高手:怎样才能将柱压降下来?
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| 我用的是安捷伦的柱子,以前用纯甲醇冲时,只有40多,做过血样后就变成130多,已经连续冲了好几天了,降到90多,就一直下不来,求各位高手帮帮忙! |
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3楼2009-08-14 23:25:09
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zzy124(金币+10,VIP+0): 8-15 10:02
zzy124(金币+10,VIP+0): 8-15 10:02
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反相柱(C18, C12, C8, C4, C2, C1, 苯基)的清洗 1. 使用完色谱柱后,建议以下列溶剂各10倍柱体积清洗: 95%水/5%乙腈 (去除缓冲盐,非盐流动相可省略) 梯度到95%乙腈/5%水 (去除强保留物质) (对250*4.6mm柱子, 0.5mL/min冲洗90min) 2. 长期使用后发现柱效、分离度明显下降,以下列溶剂各10倍柱体积清洗: 95%水/5%乙腈 四氢呋喃或异丙醇 95%乙腈/5%水 若以上方法无效,可能是柱头污染了,反接色谱柱,以下溶剂各10倍柱体积清洗: 95%水/5%乙腈 95%乙腈/5%水(建议流速为0.2mL/min,冲洗过夜,除去柱头污染物),若无效,用四氢呋喃或异丙醇反冲 3. 若上述方法仍然无效,建议再生色谱柱(但不保证有效): 甲醇-异丙醇-正己烷(30倍柱体积,对250*4.6mm柱子, 0.5mL/min冲洗3h)-异丙醇-甲醇 4. 注意:建议使用保护柱,而且经常更保护柱芯,否则柱芯拦截作用达饱和后其杂质会透过柱芯进入色谱柱中,从而缩短柱寿命! |
5楼2009-08-15 00:04:00













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