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zzy124

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】急求各位色谱高手:怎样才能将柱压降下来?

我用的是安捷伦的柱子,以前用纯甲醇冲时,只有40多,做过血样后就变成130多,已经连续冲了好几天了,降到90多,就一直下不来,求各位高手帮帮忙!
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jian_young

银虫 (初入文坛)


zzy124(金币+1,VIP+0): 8-15 22:33
确定你的其他的地方没堵??
3楼2009-08-14 23:25:09
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yomo

铁虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★
zzy124(金币+5,VIP+0): 8-14 22:30
zzy124(金币+1,VIP+0): 8-15 22:33
柱子堵了,实在没办法的话,把柱子倒过来冲,最好先看看是什么类型的物质堵了,用相对应好溶的溶剂或水冲
2楼2009-08-14 22:26:34
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i168

金虫 (著名写手)


zzy124(金币+1,VIP+0): 8-15 22:33
做了多少血样?血样没有稀释离心过滤吗?
换用乙腈水溶液冲洗看看
4楼2009-08-14 23:38:38
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djc9801

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
zzy124(金币+10,VIP+0): 8-15 10:02
反相柱(C18, C12, C8, C4, C2, C1, 苯基)的清洗

1. 使用完色谱柱后,建议以下列溶剂各10倍柱体积清洗:
95%水/5%乙腈 (去除缓冲盐,非盐流动相可省略)
梯度到95%乙腈/5%水 (去除强保留物质)
(对250*4.6mm柱子, 0.5mL/min冲洗90min)

2. 长期使用后发现柱效、分离度明显下降,以下列溶剂各10倍柱体积清洗:
95%水/5%乙腈
四氢呋喃或异丙醇
95%乙腈/5%水

若以上方法无效,可能是柱头污染了,反接色谱柱,以下溶剂各10倍柱体积清洗:
95%水/5%乙腈
95%乙腈/5%水(建议流速为0.2mL/min,冲洗过夜,除去柱头污染物),若无效,用四氢呋喃或异丙醇反冲

3. 若上述方法仍然无效,建议再生色谱柱(但不保证有效):
甲醇-异丙醇-正己烷(30倍柱体积,对250*4.6mm柱子, 0.5mL/min冲洗3h)-异丙醇-甲醇

4. 注意:建议使用保护柱,而且经常更保护柱芯,否则柱芯拦截作用达饱和后其杂质会透过柱芯进入色谱柱中,从而缩短柱寿命!
5楼2009-08-15 00:04:00
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