24小时热门版块排行榜    

查看: 554  |  回复: 6
当前主题已经存档。

yoyoyehan

[交流] 不长菌落怎么办?

各位虫友,我现在做转化试验,目的是测序,可是做的LB培养基不长菌落,怎么办? 用的是上海生工的DH5α,连接片段1000bp左右,
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smallcat227

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
司马诸葛(金币+1,VIP+0):奖励一下 8-14 18:58
引用回帖:
Originally posted by yoyoyehan at 2009-8-14 15:32:
各位虫友,我现在做转化试验,目的是测序,可是做的LB培养基不长菌落,怎么办? 用的是上海生工的DH5α,连接片段1000bp左右,

1.抗生素浓度是否太高;
2.感受态细胞是否存活,感受态效率是否正常,可以转化未连接目的片段的空载体试试;
3.涂布时是否把菌烫死
2楼2009-08-14 18:01:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cauzhangtao

木虫 (正式写手)

看活性好不好。
3楼2009-08-14 19:08:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
连接确定没有出问题么?转化不出东西多半是连接那步出问题了.试着作几个对照看看是哪里的问题.
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
4楼2009-08-14 19:14:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gastrodia

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
重新做,做的时候做个空质粒转化的对照
5楼2009-08-15 11:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rural2084

木虫 (正式写手)

估计是连接出问题了,如果用的是连接试剂盒,连接温度不要太高,25度就行
6楼2009-08-16 18:04:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vivihao

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能是连接或转化方面出了问题。连接成功与否不好验证,只有通过转化后图板,挑斑PCR与酶切后才能知道。而转化出现问题可以直接做个对照,用空质粒转化,验证感受态是否有问题。建议先做个对照,验证感受态有没有问题。
7楼2009-08-18 13:06:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yoyoyehan 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +7 holy J 2026-03-21 7/350 2026-03-24 17:24 by xiaohai104
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 081700 调剂 267分 +9 迷人的哈哈 2026-03-23 9/450 2026-03-24 11:58 by 544594351
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
信息提示
请填处理意见