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筱～筱～

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助基因敲除和回补技术！ 已有1人参与

有谁知道基因敲除和回补菌株的构建吗？

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1楼 2021-06-17 08:43:39
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
细菌的吗

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2楼2021-06-17 21:18:24
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筱～筱～

新虫 (初入文坛)
细菌真菌都可以

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3楼2021-06-18 09:22:32
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个问题有点太宽泛了，应该根据你目标菌株，选择合适的敲除和回补策略吧，比如这个宿主遗传操作时常用的一些工具和方法，整合型载体，游离性载体，如何进行转化筛选等等，有了工具后就需要对目标基因进行实验设计，包括定位目的基因，设计同源臂，克隆筛选策略等，希望对你有帮助，祝好。
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筱～筱～
天空才是极限，我有信心飞的更高！
4楼2021-06-18 09:40:14
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forhighbio

捐助贵宾 (著名写手)
细菌可以用cas系统和同源重组载体系统。真菌敲除，除了模式菌，一般都是自杀载体敲除。

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筱～筱～
5楼2021-06-19 22:36:16
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筱～筱～

新虫 (初入文坛)
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引用回帖:
4楼: Originally posted by 原海亮 at 2021-06-18 09:40:14
这个问题有点太宽泛了，应该根据你目标菌株，选择合适的敲除和回补策略吧，比如这个宿主遗传操作时常用的一些工具和方法，整合型载体，游离性载体，如何进行转化筛选等等，有了工具后就需要对目标基因进行实验设计， ...

好的，谢谢你，我们是要用同源重组的方法，但是我引物设计用的软件是primer 5，然后不太懂怎么设计这个引物

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6楼2021-06-20 23:12:20
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筱～筱～

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by forhighbio at 2021-06-19 22:36:16
细菌可以用cas系统和同源重组载体系统。真菌敲除，除了模式菌，一般都是自杀载体敲除。

好的，谢谢你

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7楼2021-06-20 23:12:53
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3836345

捐助贵宾 (小有名气)
可以考虑交给别人做，省时间
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8楼2021-06-24 12:07:00
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