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筱～筱～

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[求助] 求助基因敲除和回补技术！已有1人参与

有谁知道基因敲除和回补菌株的构建吗？

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1楼 2021-06-17 08:43:39

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biosci

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细菌的吗

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2楼2021-06-17 21:18:24

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筱～筱～

新虫 (初入文坛)

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细菌真菌都可以

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3楼2021-06-18 09:22:32

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原海亮

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

这个问题有点太宽泛了，应该根据你目标菌株，选择合适的敲除和回补策略吧，比如这个宿主遗传操作时常用的一些工具和方法，整合型载体，游离性载体，如何进行转化筛选等等，有了工具后就需要对目标基因进行实验设计，包括定位目的基因，设计同源臂，克隆筛选策略等，希望对你有帮助，祝好。

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筱～筱～

天空才是极限，我有信心飞的更高！

4楼2021-06-18 09:40:14

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forhighbio

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细菌可以用cas系统和同源重组载体系统。真菌敲除，除了模式菌，一般都是自杀载体敲除。

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筱～筱～

5楼2021-06-19 22:36:16

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筱～筱～

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引用回帖:

4楼: Originally posted by 原海亮 at 2021-06-18 09:40:14
这个问题有点太宽泛了，应该根据你目标菌株，选择合适的敲除和回补策略吧，比如这个宿主遗传操作时常用的一些工具和方法，整合型载体，游离性载体，如何进行转化筛选等等，有了工具后就需要对目标基因进行实验设计， ...

好的，谢谢你，我们是要用同源重组的方法，但是我引物设计用的软件是primer 5，然后不太懂怎么设计这个引物

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6楼2021-06-20 23:12:20

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