| 查看: 1514 | 回复: 6 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者abcjlm将赠送您 10 个金币 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
abcjlm铜虫 (小有名气)
|
[求助]
发酵液过滤 已有1人参与
|
|
| 使用BL21表达菌株，5L发酵罐发酵，离心收集菌体，使用高压均质机破碎，离心收集上清，但是发现上清液很难使用0.45um膜过滤，已经使用10000g离心了，细胞碎片已经被离下去了，咋怎么难过滤？是发酵液菌体死亡的原因，还是均质过程的原因？急急急 |
回复此楼» 猜你喜欢
322分 085600求调剂，有互联网+国金及主持省级大创经历
已经有3人回复
-
320材料一志愿西工大专硕英二数二 有两年光伏工作经验
已经有3人回复
-
一志愿郑州大学，学硕，物理化学， 333求调剂
已经有5人回复
-
一志愿中石油，化学工程，301求调剂
已经有3人回复
-
0703化学求调剂，总分320分，一志愿中南民族大学
已经有3人回复
-
320材料与化工，求调剂
已经有7人回复
-
一志愿武汉理工大学-085602-总分296分-求调剂
已经有5人回复
-
286
已经有3人回复
-
070300化学 280 一志愿太原理工 求调剂
已经有5人回复
-
085600材料与化工（高分子）290分求调剂
已经有4人回复
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2021-06-16 13:58:05
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
不清楚你用0.45μm过滤的目的是什么，我们通常离心收集上清后即可进行下一步的操作。 大肠杆菌发酵菌体破碎后，上清液看似清亮（有的时候破碎液粘度大，离心分离也很难拿到清亮的上清液），里面除了一部分可溶性蛋白外，还有破壁后大肠杆菌的一些核酸等物质，这些蛋白和核酸使得上清液不像纯化水一样，是具有一定的粘性的，所以在进行膜过滤的时候很难过滤。 如果你的重组蛋白在上清中，又必须经过0.45μm的膜过滤，可以尝试在膜过滤前对上清液进行低浓度的盐析处理，比如用硫酸铵沉淀的方法将上清液中一些杂蛋白提前除去一部分，这样重新离心获得的上清会比较容易过滤（使用硫酸铵沉淀技术，应该提前进行小试实验，确定硫酸铵的使用饱和度，避免目标重组蛋白的损失）。 祝好！ |
2楼2021-06-16 13:55:54
abcjlm
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1132.9
- 散金: 4
- 红花: 6
- 帖子: 280
- 在线: 20.2小时
- 虫号: 1415899
- 注册: 2011-09-24
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
4楼2021-06-16 14:14:59
abcjlm
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1132.9
- 散金: 4
- 红花: 6
- 帖子: 280
- 在线: 20.2小时
- 虫号: 1415899
- 注册: 2011-09-24
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
5楼2021-06-16 14:17:06
