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greatsaint

银虫 (小有名气)

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[交流] 质粒电泳会出现几条带

我先前做了pcr片段的克隆，对阳性克隆扩大培养并提取质粒，然后跑电泳，只出现一条带。我的质粒大约5kbp。我看有资料说由于质粒构象的不同可能会出现三条带或更多。提取质粒后电泳到底会出现几条带？我这里出现了一条带正常吗？

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1楼 2009-08-13 17:38:09

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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

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正常质粒是闭合的双链DNA。在电泳过程中可能使质粒发生开环，或者由开环解开螺旋变成线形。这三种形态电泳时的分离率不同，分离速度不同，分成三带。闭环（超螺旋），开环，线形的螺旋率依次降低。
所以质粒电泳时也并不一定会出现三条带，只是有可能。当然部分质粒发生变化，其量的大小也并不一定就能够检测出来。所以有可能部分发生了变化，跑出来三条，但量很少，根本就看不出来。