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greatsaint

银虫 (小有名气)

[交流] 质粒电泳会出现几条带

我先前做了pcr片段的克隆,对阳性克隆扩大培养并提取质粒,然后跑电泳,只出现一条带。我的质粒大约5kbp。我看有资料说由于质粒构象的不同可能会出现三条带或更多。提取质粒后电泳到底会出现几条带?我这里出现了一条带正常吗?
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
正常质粒是闭合的双链DNA。在电泳过程中可能使质粒发生开环,或者由开环解开螺旋变成线形。这三种形态电泳时的分离率不同,分离速度不同,分成三带。闭环(超螺旋),开环,线形的螺旋率依次降低。
所以质粒电泳时也并不一定会出现三条带,只是有可能。当然部分质粒发生变化,其量的大小也并不一定就能够检测出来。所以有可能部分发生了变化,跑出来三条,但量很少,根本就看不出来。
VX:19192310212;公众号:生物技术与IVD
8楼2009-08-17 10:48:47
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bio_linda


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
由于质粒的螺旋程度不同,显示出来的条带会有所差异,出现一到三条都是正常的
2楼2009-08-13 18:48:56
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sgba0307

铁虫 (小有名气)

正常的,我每次提后电泳也只有一条带
3楼2009-08-13 19:40:44
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greatsun

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
也有可能是不同的结构在电泳时没有分开,所以就是一条带了!!
5楼2009-08-14 10:59:28
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