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richenim

金虫 (小有名气)

[交流] 细胞培养:消化液中0.53mM的EDTA如何配制?

我想请教下:
1.消化液中0.53mM的EDTA的配方?(我买的是EDTA.2NA)(是用PBS还是三蒸水配制?)
2.配制消化液时,是将胰酶和EDTA一起混合配制,还是将胰酶和   EDTA分别配制后,使用时再1:1混合啊?
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richenim

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-8-15 14:50:


对,不定容也可以的~~
这种粗放的操作没必要那么精确

哦,谢谢!
我再请教下,为什么有些消化液的配方还需要加葡萄糖和碳酸氢钠啊?有没有一个准确的消化液配方啊?(我要配的是0.25%胰酶—0.53mM EDTA,我用的是EDTA2Na)  
谢谢!
7楼2009-08-15 15:38:32
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wylcyy

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
richenim(金币+1,VIP+0): 8-15 09:25
amisking(金币+1,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-15 10:01
1、用PBS配制;
2、配置后在混匀,防止局部浓度过高。
现在试剂公司一般都有配制好的现成的胰酶-EDTA卖
2楼2009-08-14 14:36:30
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richenim

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by wylcyy at 2009-8-14 14:36:
1、用PBS配制;
2、配置后在混匀,防止局部浓度过高。
现在试剂公司一般都有配制好的现成的胰酶-EDTA卖

比如我是0.25%胰酶溶解在100ml的PBS中,0.53mM的EDTA溶解在100ml的PBS中,若配制后再混匀,那胰酶和DETA的浓度不就是都改变了吗?
3楼2009-08-15 09:30:09
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ljsh

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★
richenim(金币+1,VIP+0): 8-15 14:20
amisking(金币+2,VIP+0): 8-15 15:08
1.先用PBS配制0.5M或4%的EDTA溶液及胰酶浓溶液
2.根据最后稀配的总体积,计算出要加多少体积0.5M或4%EDTA及胰酶浓溶液
3.吸取EDTA及胰酶浓溶液,最后用PBS定容至所需总体积.
4楼2009-08-15 10:19:56
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