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做快速核酸检测需要知道的那些技术(六)
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今天我们来分享关于用重组酶和聚合酶等温检测成品试剂盒做实验中需要注意的事项等。 1.用重组酶和聚合酶等温检测成品试剂盒跑胶过程中,没有条带,但是胶孔里面很亮,一般是什么原因? 可能是没有纯化造成的,需要按照纯化方法进行纯化。 2.跑电泳的反应时间大概需要多久? 浓度低的话,40分钟,浓度高的话可以时间短点,20~30分钟都可以。 3.跑电泳和荧光法有什么区别? 跑电泳款基本就是恒温扩增的基本版本。 荧光的是额外加了个酶可以切割探针。 4.DNA变RNA是转录,那RNA变DNA是什么? RNA变DNA是逆转录。 5.我可以在前引物标记荧光素,后引物标记生物素,而不设计探针可以吗? 可以这样用,但假阳性概率大,需要大量筛选引物。 6.核酸内切酶针对哪个探针的?eco? nfo? fpg? 还是其他? 应该是针对nfo。 |
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