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小白3521

金虫 (小有名气)

[交流] 很糟糕的电泳图,大家帮忙分析一下

最近实验室电泳图都很不清楚,包括marker都跑的模模糊糊的,这是用简并引物扩的cDNA,每个孔都点了20ul的样,都不亮,而且感觉几个带都粘到一块了。
用的是1%的胶,缓冲液TBE,80的电压,跑的时间挺长的,跑了45min,我们是泡的胶,EB浓度我不清楚,感觉泡胶液用了挺久的了,marker应该是7条带
不知道是不是胶的问题,师兄说这次买来的tris质量好像不好,配的缓冲液都有点沉淀
我把电泳图放到附件里了,大家帮忙看看啊,谢谢啦
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panacea007

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
司马诸葛(金币+1,VIP+0):奖励一下 8-13 15:30
调好焦,更换新的TBE buffer,重新做块胶再跑。

简并引物本身扩增会有错配,形成一些smear也正常,但是这个图太夸张了。

上面一排亮的是什么?上样孔?这么亮啊,EB胶也不至于这样吧。
3楼2009-08-13 12:45:52
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
怀疑你是拍照的时候焦距没调好
2楼2009-08-13 11:27:52
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tancf

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可以适当调高点电压,电压太低跑的时间长的话,会扩散的,就会模糊。
5楼2009-08-13 15:49:17
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