24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 861  |  回复: 3
【悬赏金币】回答本帖问题,作者量大_农民将赠送您 5 个金币

量大_农民

新虫 (初入文坛)

[求助] 过表达做验证已有2人参与

做过表达,转化到大肠杆菌,板子上能长菌,但是挑了菌,想做一下连接的验证,发现竟然跑不出条带,这是咋回事呀

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fcesfd

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

做蓝白斑实验,挑选转化成功的菌群,摇菌培养后提取DNA,再PCR。
2楼2021-05-31 14:33:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

321hanxiao

新虫 (初入文坛)

3楼2021-06-01 10:04:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你的问题描述比较简单,是要在大肠杆菌中过表达某基因么?还是用大肠杆菌做亚克隆?转化进大肠杆菌的是游离性载体还是整合型的?

       连接验证使用的是什么方法呢?PCR或者酶切?

       抗性筛选的情况下有菌生长,但是没有目的条带,多半是一些空载体造成的假阳性,应该从片段处理、载体处理、连接转化、阳性筛选方法进行全面的分析来解决问题,祝好!
天空才是极限,我有信心飞的更高!
4楼2021-06-01 16:52:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 量大_农民 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
信息提示
请填处理意见