应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 肝癌细胞系转染
51/1返回列表
查看: 1571  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者沐夕微暖将赠送您 100 个金币

沐夕微暖

新虫 (小有名气)

[求助] 肝癌细胞系转染 已有1人参与

请问各位虫友，1.肝癌细胞Huh7，hepG2系做8kb以上带GFP的质粒转染（用的lipo2000），1-2天后观察几乎没有绿色荧光，是因为质粒太大了么？我以前转染4kb的GFP质粒，Huh7效率达到80%，hepG2达到30%。
2. 依然是这两个细胞系，用lipo2000做siRNA转染，转染前细胞密度50%，转染后细胞状态挺好的，12h后显微镜下观察带有FAM荧光基团的siRNA的转染效率，如图（HepG2）都是点状荧光，细胞没有整体变绿，是因为转染效率太低了么（huh7也差不多是这样）？要怎么样才能提高转染效率呢？请各位虫友不吝赐教，万分感激！

@gyesang 发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-05-13 19:45:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沐夕微暖

新虫 (小有名气)
肝癌细胞系转染

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
2楼2021-05-13 19:46:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
你这荧光显微镜背景有点儿高，考虑这个质粒的GFP可能表达量不是很高，在这种背景下看不出来
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2021-05-14 10:04:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

辛夷?

新虫 (初入文坛)
我的si也是这样，也做了hep，楼主后来成功了吗？能分享下经验吗

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2023-06-28 10:37:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

细胞状态怎么样？调整好细胞转态，要不就换了转染方式，使用慢病毒转染或者质粒电转
赞一下 回复此楼
5楼2023-08-12 17:31:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 沐夕微暖 的主题更新
51/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +17 Lanmanbaby 2026-08-09 29/1450 2026-08-12 00:24 by zhanghaozhu
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭