应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒手提求助
31/1返回列表
查看: 761  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者电子显微镜将赠送您 10 个金币

电子显微镜

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒手提求助 已有1人参与

最近一直都在做质粒扩增提取，用的是碱裂解法，但是跑电泳都没有条带，完全空的那种。具体操作是先离心获得菌体沉淀，然后加250μl p1，250μl p2，350μl p3，13000rpm离心10min，往上清中加异丙醇后冰浴10min，再离心，最后用70%乙醇清洗，加20μl水后跑电泳检测。麻烦各位大佬帮忙看看，哪一步出现了问题？谢谢?

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-05-09 14:34:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sannny

新虫 (正式写手)
买个试剂盒吧

发自小木虫Android客户端
回复此楼
2楼2021-05-09 15:11:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tjj451679479

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先，能买试剂盒就买个吧，国产的就行了，也不贵；其次如果是必须手提且确认碱裂解过程可靠无误的话，请注意上清加入异丙醇之后会有质粒析出，需轻轻颠倒或吹吸（别用枪头用一次性滴管）混匀至析出肉眼不可见；最后，加入70%乙醇漂洗离心后EP管（最好1.5mL）底部会有析出沉淀，请用不褪色记号笔在EP管外表面圈出其位置，再在生物安全柜之类的大风力且洁净的设备内吹干至沉淀透明不可见，此后再用ddH2O复溶。
赞一下 回复此楼
3楼2021-05-10 09:09:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 电子显微镜 的主题更新
31/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭