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标曲浓度点的确定： 大鼠给药方案是 将规格为1mg/ml的药物，根据大鼠体重按照5ml/kg进行尾静脉注射给药（一共三种药物A，B C），理想状态下，一只大鼠最重约300g,给药量最大=0.3kg*5ml*1mg/ml=1.5mg,大鼠体内全部血液视为15ml,即最高血药浓度为1.5mg/15ml=0.1mg/ml。 根据药物非临床药代动力学研究技术指导原则，标曲的线性范围应该包括5个半衰期浓度，故标曲浓度设置如下： 0.2mg/ml（200ppm）、0.1mg/ml（100ppm）、0.05 mg/ml（50ppm）、 0.02 mg/ml（20ppm）、0.01 mg/ml（10ppm）、0.005 mg/ml（5ppm）、0.002 mg/ml（2ppm）、0.001 mg/ml（1ppm）. 浓度太大，仪器（安捷伦6460）不敢进这么大的浓度，因此需要稀释标曲倍数： 稀释标曲100倍： 2ppm, 1ppm, 0.5ppm, 0.2ppm, 0.1ppm, 0.05ppm, 0.02ppm, 0.01ppm 那么血样我们需要怎么处理才能满足稀释100倍呢？ 方案一：取10ul样本血样，加空白血990ul，得稀释100倍后的血样，然后取稀释后的血样100ul, 加入A、B、C药物对照品溶液各10ul，加入内标IS 10ul, 再加入乙腈260ul,沉淀蛋白，涡旋3min，再12000r/min 高速离心10min，取上清液进样。 如果按照上述方案进行，样本血样加空白血稀释了100倍之后，再加乙腈沉淀蛋白（此处稀释了4倍），那么样本的稀释倍数是不是变成了400倍？ 方案二： 取10ul样本血样，加空白血240ul，得稀释25倍的血样，然后取上述所得血样100ul, 加入A、B、C药物对照品溶液各10ul，加入内标IS 10ul, 再加入乙腈260ul,沉淀蛋白，涡旋3min，再12000r/min 高速离心10min，取上清液进样。 如果按照方案二，是血样用空白血稀释了25倍，前处理乙腈稀释了4倍，共100倍 请问老师，这两种稀释方案哪种可行吗？如果都不可行，求老师指导！谢谢老师 |
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你这个剂量我估计血药浓度顶多0.03mg/ml，稀释的话不会用血浆去稀释的，直接十倍沉淀，再用进样溶液稀释，满足灵敏度前提下稀释越多越好 发自小木虫Android客户端 |
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药化小菜鸡2楼2021-05-03 11:07:02
panyuanfu
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