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abcjlm铜虫 (小有名气)
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[求助]
amp抗性菌发酵
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| amp抗性菌发酵过程中会产生内酰胺酶，是抗生素降解，会使发酵液中抗生素浓度降低，不含质粒的菌株疯长或拷贝数降低，导致重组蛋白浓度降低，请问有什么好的解决办法吗 |
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forhighbio 
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2楼2021-04-30 11:10:24
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由于amp是β内酰胺类抗生素，其作用机理跟kana等抗生素不一样，它的内酰胺环会被质粒amp抗性基因表达的酶切割断裂，从而水解amp，使带抗性基因的细胞得以存活。对于摇瓶低密度表达，amp的量足够，所以还好。但要是上罐发酵，菌体密度大，加入的amp被水解消耗，可能导致质粒丢失、污染等情况，虽然可以通过补加amp的措施补救，但由于不好监控，且对细胞生长状态以及不同批次的重复性等等都会产生影响，所以不推荐这么干。最方便的就是改质粒抗性。另外，如果是制药，中国药典是明确规定发酵不得使用内酰胺类抗生素的。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2021-05-01 13:07:06
4楼2021-05-11 16:03:40
40