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湛西新虫 (小有名气)
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[求助]
细菌基因敲除的接合筛选已有1人参与
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我在做一个弧菌的基因敲除,使用的是利用自杀质粒的双交换同源重组方法。我将含有重组质粒的大肠杆菌和弧菌涂布到双抗板(弧菌抗氨苄,质粒上有卡那的抗性基因)上后,取长出来的菌做pcr,引物是融合同源臂两端的引物,理论上条带应该有两条,一条是融合同源臂的,一条是上下同源臂间夹着待敲除基因的。但现在只有融合同源臂的条带,我想请问下大家这是怎么回事,是因为自杀质粒选的不好导致它复制了吗?急,请求大家的帮助。 发自小木虫Android客户端 |
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