| 查看: 369 | 回复: 2 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
myselfsky8159木虫 (著名写手)
|
[交流]
植物线粒体提取的方法
|
||
| 关于植物线粒体提取的方洗。。。请高手赐教。。。 |
回复此楼» 猜你喜欢
280分求调剂 一志愿085802
已经有6人回复
-
0854电子信息求调剂
已经有3人回复
-
263求调剂
已经有4人回复
-
石河子大学（211、双一流）硕博研究生长期招生公告
已经有3人回复
-
一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂
已经有13人回复
-
北科281学硕材料求调剂
已经有6人回复
-
328求调剂，英语六级551，有科研经历
已经有10人回复
-
298求调剂
已经有6人回复
-
310求调剂
已经有4人回复
-
311求调剂
已经有6人回复
laojiu9878
至尊木虫 (知名作家)
九牛
- 应助: 60 (初中生)
- 金币: 30310
- 红花: 3
- 帖子: 9706
- 在线: 230.8小时
- 虫号: 617287
- 注册: 2008-10-05
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+4,VIP+0):欢迎发帖交流，但是希望能够整理一下在发布！ 8-11 12:40
myselfsky8159(金币+3,VIP+0):谢谢。。 8-11 14:40
amisking(金币+4,VIP+0):欢迎发帖交流，但是希望能够整理一下在发布！ 8-11 12:40
myselfsky8159(金币+3,VIP+0):谢谢。。 8-11 14:40
| 取暗培养10 天左右、 长约10-15 cm 的水稻黄化苗30 g, 用20% 次氯酸钠表面消毒10min, 然后用预冷无菌水冲洗，用无菌纱布吸干水， 然后用剪刀将黄化苗截成约1 mm 的小段, 加入3倍体积的匀浆缓冲液(50 mmol/l Tris-HCL , PH 8. 0、0. 3 mol/L 甘露醇、0.2 mol/L 蔗糖、1mmol/L EDTA , PH 8. 0、0. 1% BSA、0. 6% PV P、2-巯基乙醇), 用预冷的高速组织匀浆捣碎机破碎组织,10min后加入2倍体积缓冲液(蔗糖0.3 mol/L、T ris-HCl 50 mmol/L )静置20min，经4层纱布过滤, 离心管分装滤液。将滤液离心20 min (12 000 r/min, 4℃), 弃上清。向沉淀中加入悬浮液(50 mmol/L Tris-HCL , PH 8. 0、0.3 mol/L 甘露醇、0.2 mol/L 蔗糖、0. 1% BSA、0. 6% PVP) , 用毛笔轻刷沉淀使之充分悬浮,将悬浮液离心10 min （12000 r/min， 4℃）, 得到粗线粒体沉淀。然后向沉淀中加入10 mL 缓冲液(蔗糖0. 3mol/L、T ris-HCl 50mmol/L ) , 终浓度为0. 01 mol/L 6μΙ MgCl2, 分别加入0.6 μΙ，1.0 μΙ，1.4 μΙ，1.8 μΙ的DNase (150 μg/mL), 4℃保温1～2 h，并且每隔20 min轻摇一次。加入EDTA 至终浓度20 mmol/L ,中止DNase I 反应。将此溶液小心置于20 mL 0.6 mol/L蔗糖溶液介质上(0.3 mol/L 甘露醇、50 mmol/LTris-HCL， 0.6 mol/L 蔗糖) , 10000 r/m in离心20 min, 所得的沉淀为较纯的线粒体。 |
2楼2009-08-11 11:29:16
aaaaaa1380
至尊木虫 (知名作家)
- 应助: 45 (小学生)
- 金币: 17464
- 散金: 166
- 红花: 12
- 帖子: 7952
- 在线: 643.9小时
- 虫号: 422850
- 注册: 2007-07-17
- 专业: 蛋白质组学
植物线粒体提取的一种简捷方法
★ ★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-11 12:40
myselfsky8159(金币+2,VIP+0):谢谢。。。。 8-11 14:41
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-11 12:40
myselfsky8159(金币+2,VIP+0):谢谢。。。。 8-11 14:41
3楼2009-08-11 12:35:30
