| 查看: 3334 | 回复: 6 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者海韵楠馨将赠送您 10 个金币 | ||
海韵楠馨新虫 (小有名气)
|
[求助]
DNS试剂测定α-淀粉酶抑制剂活性
|
|
|
大家好，本人想测定某种物质对α-淀粉酶的抑制作用。采用的是DNS法测定产物糖的方法。 我是自己提取天然产物，然后买淀粉酶，测定天然产物对淀粉酶的抑制作用。 根据文献的步骤修改：精确吸取 0. 1mL的样品 和 0. 1mL 5U/mL的α-淀粉酶溶液（用浓度与样品与对照品区分不开），充分混匀，在 37℃下反应10 min，然后加入0.1mL 1%可溶性淀粉液，在 37 ℃水浴中准确反应 5 min。再加入 0.2mL DNS 显色剂，在沸水浴中反应 3 min，之后立即用流动自来水冷却 (终止反应)，用PBS稀释10倍在 540 nm 波长下测定吸收度，记为 OD。 样品用2%DMSO*PBS配置、1%可溶性淀粉液及酶液都是用PBS配置的。3,5-二硝基水杨酸(DNS)溶液从试剂公司购买。 但是根据这个步骤做出来，样品组（样品+α-淀粉酶溶液），空白对照组（用2%DMSO*PBS代替样品，其他同上），阴性组（用PBS代替酶，其他与样品/空白组一致）煮沸6分钟后，红棕色颜色很深，PBS稀释减去阴性对照OD后，样品浓度梯度小时，样品组OD值与空白组OD值几乎差不多，样品吸光度参差不齐，无趋势，有几次做还会比空白组高。浓度梯度大时，有效果趋势。 求大神帮忙，我是试了好多还不出满意结果，希望各位大神提供帮助，谢谢！@lifeliuyan |
回复此楼» 猜你喜欢
化学308分求调剂
已经有17人回复
-
机械专硕273请求调剂
已经有4人回复
-
266求调剂
已经有12人回复
-
0703化学调剂 348分
已经有11人回复
-
293调剂
已经有11人回复
-
电子信息270求调剂
已经有7人回复
-
263求调剂
已经有5人回复
-
一志愿华南师范361分，化学求调剂
已经有8人回复
-
材料307分求大佬组收留
已经有8人回复
-
化学调剂求助
已经有9人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
2楼2021-04-18 17:36:55
海韵楠馨
新虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 227.6
- 散金: 10
- 帖子: 58
- 在线: 6.9小时
- 虫号: 26097371
- 注册: 2021-03-31
- 性别: GG
- 专业: 中药药效物质
3楼2021-04-19 08:52:21
4楼2021-05-06 00:46:18
海韵楠馨
新虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 227.6
- 散金: 10
- 帖子: 58
- 在线: 6.9小时
- 虫号: 26097371
- 注册: 2021-03-31
- 性别: GG
- 专业: 中药药效物质
5楼2021-05-12 16:34:55
6楼2021-09-04 15:23:25
7楼2022-04-13 21:08:04
100