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多肽色谱峰拖尾 已有1人参与
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本人做的一个多肽药物，分子量大约4000，方法转出方提供色谱条件：水相：0.1%三氟乙酸水，有机相：0.1%三氟乙酸乙腈，梯度系统，色谱柱waters xbridge 4.6*150mm，5um。主峰峰形良好，未见明显拖尾且方法稳定。 方法转移至本实验室后，除液相品牌不同，色谱柱规格等完全一致。发现刚开始进样时色谱峰峰形尖锐（第一张图），进样约40针后主峰明显拖尾（第二张图），拖尾因子约3点多，将水相和有机相三氟乙酸比例调至0.3%后色谱峰峰形变好，拖尾因子约1.2。然而重复实验约10个分析批后，色谱峰再次拖尾明显，将三氟乙酸比例调至0.5%峰形有所好转。 经过比较，色谱柱压力跟第一次实验时基本无变化，且按工程师指导用乙腈水等充分冲洗色谱柱，未见峰形变好，只有通过调节三氟乙酸比例观察到有所好转。求助各位站友，这种情况该如何继续实验，非常担心再次买一根新柱子后又是这种情况。    发自小木虫Android客户端 |
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