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wrq99

新虫 (初入文坛)

[交流] 多肽色谱峰拖尾 已有1人参与

本人做的一个多肽药物,分子量大约4000,方法转出方提供色谱条件:水相:0.1%三氟乙酸水,有机相:0.1%三氟乙酸乙腈,梯度系统,色谱柱waters xbridge 4.6*150mm,5um。主峰峰形良好,未见明显拖尾且方法稳定。

方法转移至本实验室后,除液相品牌不同,色谱柱规格等完全一致。发现刚开始进样时色谱峰峰形尖锐(第一张图),进样约40针后主峰明显拖尾(第二张图),拖尾因子约3点多,将水相和有机相三氟乙酸比例调至0.3%后色谱峰峰形变好,拖尾因子约1.2。然而重复实验约10个分析批后,色谱峰再次拖尾明显,将三氟乙酸比例调至0.5%峰形有所好转。

经过比较,色谱柱压力跟第一次实验时基本无变化,且按工程师指导用乙腈水等充分冲洗色谱柱,未见峰形变好,只有通过调节三氟乙酸比例观察到有所好转。求助各位站友,这种情况该如何继续实验,非常担心再次买一根新柱子后又是这种情况。

多肽色谱峰拖尾


多肽色谱峰拖尾-1


多肽色谱峰拖尾-2


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你好小玮

银虫 (正式写手)

多肽高手



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1、0.1%TFA的pH在2.0左右的,可以和色谱柱厂家沟通一下,填料是否耐的住长时间pH=2.0下
2、1条件不行话,可对分析方法进行调整和优化,TFA的分析方法只有通用的而已,未见得是最佳的
2楼2021-04-25 09:56:13
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